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免疫荧光染色试剂盒(小鼠IgG,DyLight488)图片
产品货号:
ZN1847
中文名称:
免疫荧光染色试剂盒(小鼠IgG,DyLight488)
英文名称:
DyLight488-SABC(mouse IgG)kit
产品规格:
300T|600T|1500T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒基于SABC系统,适用于一抗类型为小鼠IgG的免疫荧光检测。SABC-DyLight488将链霉亲和素-生物素引入荧光系统,能进一步提高敏感性及降低背景。DyLight 488最大吸收峰493nm,最大发射峰518nm,呈黄绿色。


DyLight是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料,由于具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度,更高的光学耐受性(抗淬灭性)和特异性,对pH不敏感、分子较小而渗透性更好的优势,标记的抗体比Cy2和FITC标记的更亮,但背景更低。


组分300T600T1500T效价说明
正常山羊血清2mL4mL10mL1:10用于组织切片的封闭
生物素标记羊抗小鼠IgG200μL400μL1mL1:100生物素标记二抗
SABC-DyLight488200μL400μL1mL1:200~800SABC-DyLight 488荧光染料
滴瓶3个稀释试剂用

保存:4℃,切勿冷冻,有效期一年。


  • 粘片剂APES(ZN1946)或POLY-L-LYSINE(ZN1945)。
  • EDTA修复液(ZN1951)。
  • 0.02M PBS(pH7.2~7.6)配法(ZN2950):1000mL蒸馏水中加氯化钠9g,Na2HPO4·12H2O 7g,NaH2PO4·2H2O 0.5g。



  • 石蜡片热修复染色步骤:
    • 石蜡切片,常规脱蜡至水。
    • 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
    • 热修复抗原:将切片浸入到EDTA修复液中,微波炉加热到沸腾后断电,间隔5~10min再修复1~2次,冷却。
    • 滴加稀释的正常山羊血清封闭液(稀释比1:10),室温20min,甩干,勿洗。
    • 滴加适当稀释的一抗,37℃孵育1~2小时或4℃过夜。PBS冲洗,5min×3次。
    • 滴加稀释的生物素标记羊抗小鼠IgG,37℃孵育30min。PBS冲洗,5min×3次。
    • 滴加稀释的SABC-DyLight 488,37℃孵育30min。PBS冲洗,5min×3次。
    • 水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。
    • 荧光显微镜观察。
  • 石蜡片酶消化染色步骤:
    将A程序的第4步:滴加酶消化液室温5~10min。酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。蒸馏水洗2min×3次。
  • 石蜡切片酶不消化/修复程序:
    对于不需要微波修复或消化的抗原,省略A程序中的第4步即可。
  • 细胞片的染色步骤:
    • 爬片。圆形盖破片经防脱片剂处理(Poly-L-Lysine),灭菌,备用。贴壁细胞消化后加入放有盖玻片的24孔板中培养1~2天,使细胞贴壁。悬浮细胞则处理后直接涂片,使细胞贴附。
    • 固定。4℃预冷4%多聚甲醛固定20min或冷丙酮固定10min。蒸馏水洗2min×3次。
    • 打孔。0.25% Triton X-100处理细胞15min。(若采用丙酮固定则此步骤可省略)
    • 酶消化处理室温5~10min。酶消化可选用复合修复液(ZN1952)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)。蒸馏水洗2min×3次。
    • 滴加稀释的正常山羊血清封闭液(稀释比1:10),室温20min,甩干,勿洗。
    • 滴加适当稀释的一抗,37℃孵育1~2小时或4℃过夜。PBS冲洗,5min×3次。
    • 滴加稀释的生物素标记羊抗小鼠IgG,37℃孵育30min。PBS冲洗,5min×3次。
    • 滴加稀释的SABC-DyLight 488,37℃孵育30min。PBS冲洗,5min×3次。
    • 水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。
    • 荧光显微镜观察。

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