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BalbECL SuperUT是一种极超敏的以luminol为基础的ECL化学发光试剂盒，发光效果显著优于BalbECL UT，可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶(HRP)发生化学反应，发出萤光，从而可以通过适当的化学发光成像设备或用X光片压片以检测样品。

BalbECL SuperUT的高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量。同时必须注意适当减少一抗和二抗或样品的用量，以免获得过深的难以比较灰度的条带。BalbECL SuperUT对PVDF膜和硝酸纤维素膜均适用。PVDF膜和硝酸纤维素膜可以向百奥莱博订购。

Western萤光检测试剂目前共有四种，分别是BalbECL Plus、BalbECL Star、BalbECL UT和BalbECL SuperUT。常规的Western检测，优先推荐使用BalbECL Star。对于丰度比较高的目的蛋白的检测，例如内参蛋白等的检测，也可以使用性价比更高的BalbECL Plus。对于低丰度较难检测的目的蛋白，优先推荐使用高灵敏的BalbECL UT，或灵敏度更高的BalbECL SuperUT。但对于丰度适中的目的蛋白的检测，不太推荐使用BalbECL UT或BalbECL SuperUT，容易产生过曝的现象。

• BalbECL SuperUT灵敏度极高，Western检测效果比BalbECL UT显著更佳，检测灵敏度约可以提高两倍。BalbECL SuperUT和BalbECL UT的Western blot的检测效果对比如下。
  
  图1．Western检测过程中仅发光试剂不同，其余完全相同，检测的目标条带为GAPDH。图中可见，BalbECL SuperUT的检测灵敏度大约为BalbECL UT的2倍或比2倍略高。实际检测效果会因实验条件、检测仪器的不同而存在差异，本图仅供参考。
  
• BalbECL SuperUT的发光强度高，与BalbECL UT的发光信号比较如图2所示。在20μL稀释至1.2pg/μl (图2A)或6pg/μl (图2B)辣根过氧化物酶标记链霉亲和素中，分别加入100μL的BalbECL SuperUT或BalbECL UT工作液后，在不同时间点通过多功能酶标仪检测化学发光。检测数据显示在1小时内BalbECL SuperUT的发光效果显著优于BalbECL UT。较低浓度HRP标记物时，30分钟内BalbECL SuperUT的发光效果保持在BalbECL UT的3倍以上(图2A)；较高浓度HRP标记物时，信号衰减速率更快，但30分钟内BalbECL SuperUT的发光效果能维持在BalbECL UT的2倍左右(图2B)。
  
  图2．BalbECL SuperUT和BalbECL UT的检测效果对比。相同量的低浓度(A)和高浓度(B)辣根过氧化物酶标记链霉亲和素，与发光试剂混合后至图中指定时间检测化学发光，发光信号对BalbECL UT在起始时的值做归一化处理。图中可见BalbECL SuperUT在1小时内发光效果显著优于BalbECL UT。实际检测效果会因实验条件、检测仪器的不同而存在差异，本图仅供参考。

• 本制品如果置于37℃避光保存，一个月内有效。如果长期不用，可以-20℃避光保存，这样可以保存更长时间。
  
• BalbECL SuperUT A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头，A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效，影响后续的使用效果。
  
• 各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效。特别是B液，含有氧化剂，比较容易被还原而失效。
  
• BalbECL SuperUT的萤光持续时间很长，但开始反应后的20～30分钟内萤光更强一些，随后萤光会逐渐减弱，因此请注意充分利用这萤光较强的30分钟进行压片或成像。
  
• 当发现BalbECL SuperUT的检测灵敏度过高而影响检测效果时，可以选择检测灵敏度稍低一些的BalbECL UT或更低的BalbECL Star进行测试，或者减少样品、一抗或二抗的用量。
  
• BalbECL SuperUT A液和B液均对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
  
• 本制品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• Western实验步骤可以参考百奥莱博的相关网页：Western实验步骤及试剂。
  
• BalbECL SuperUT工作液的配制：等体积混合适量BalbECL SuperUT A液和B液，室温放置备用。工作液宜在临检测前配制。
  
• Western二抗孵育后，并进行数次洗涤后，用Western专用方头镊子将膜取出，用吸水纸略吸去过多的液体(切勿接触膜的蛋白面)，然后置于一洁净保鲜膜上。
  
• 根据膜的大小，按每10平方厘米膜加1mL BalbECL SuperUT工作液的比例，滴加BalbECL SuperUT工作液到膜上，确保使工作液均匀覆盖在膜上，放置1～2分钟。
  
• 取膜，弃BalbECL SuperUT工作液，用吸水纸略吸去过多的液体。将膜放在两片保鲜膜中间，随后进行压片检测或化学发光成像仪检测。
  
• 压片检测：将膜固定于片夹内。暗室内压片1分钟，立即显影定影，根据结果再调整压片时间。或直接分别压片30秒、1、3、5分钟，然后一起显影定影观察结果。
  
• 化学发光成像仪检测：将膜放置到化学发光成像仪内，参考仪器说明书进行检测。