产品货号:
YT079
中文名称:
柠檬酸钠抗原修复液
英文名称:
Citrate Antigen Retrieval Solution(50X)
产品规格:
100ml
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本产品是一种最常用的抗原修复液,特别适合用于石蜡切片,也可以用于冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
本抗原修复液采用了广泛使用的柠檬酸钠缓冲液(pH6.0),可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
组分 | 规格 |
柠檬酸钠抗原修复液(50X) | 100mL |
说明书 | 1份 |
保存:4℃,有效期一年。
- 抗原修复过程可以使用染色缸和染色架或邮寄夹进行操作。塑料染色缸、染色架和邮寄夹可以很好地耐受沸水浴,而玻璃染色缸需避免骤冷骤热导致的玻璃破碎。
- 本抗原修复液使用前必须用重蒸水或Milli-Q水稀释50倍,配制成抗原修复液(1X)。
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 对于石蜡切片:
- 脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡5分钟,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5分钟,两次。90%乙醇5分钟,两次,70%乙醇5分钟,一次。蒸馏水5分钟,两次。
- 抗原修复:用重蒸水或Milli-Q水将本抗原修复液(50X)稀释50倍,配制成抗原修复液(1X),例如1mL本抗原修复液(50X)加入49mL重蒸水或Milli-Q水,混合均匀,即得50mL抗原修复液(1X)。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95~100℃加热约20分钟(加热时间可以控制在10~30分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95~100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20~30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1~2次,每次3~5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
- 脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡5分钟,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5分钟,两次。90%乙醇5分钟,两次,70%乙醇5分钟,一次。蒸馏水5分钟,两次。
- 对于冰冻切片:
用免疫染色洗涤液洗涤切片5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95~100℃加热约20分钟(加热时间可以控制在10~30分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95~100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20~30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1~2次,每次3~5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 - 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
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