产品货号:
YT073
中文名称:
Western一抗二抗清除剂(中性)
英文名称:
Antibody Stripping buffer(Neutral)
产品规格:
250ml
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本产品用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照,或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱。但是,本Western一抗二抗去除液,经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3~5次。使用本试剂只需大约20~30分钟即可实现蛋白膜的重复使用,然后可以进行封闭等后续的Western操作。
组分 | 规格 |
Western一抗二抗去除液(中性) | 2×125mL |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃,有效期一年。
- 使用辣根过氧化物酶(HRP),任何一次封闭都应当使用5%脱脂牛奶,如果使用碱性磷酸酯酶,任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。
- 本Western一抗二抗去除液仅适用于PVDF膜。用于硝酸纤维素膜时会导致转移到膜上的蛋白有非常显著的损失。
- 使用ECL、BalbECL等类似的化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测,例如DAB,NBT/BCIP,不适用于本试剂。
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 在完成Western化学发光检测后,蒸馏水中漂洗5分钟。
- 弃蒸馏水,加入适量的Western一抗二抗去除液(中性),至少需把膜完全覆盖。在摇床上漂洗10分钟。
- 弃Western一抗二抗去除液(中性),并吸尽残余液体。加入TBS、TBST或PBS漂洗3~4次,每次在摇床上漂洗3~5分钟。
- 进行封闭等Western的后续操作。
百奥莱博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。
产品货号 | YT071 | YT072 | YT073 | YT074 |
产品名称 | Western一抗二抗 清除剂(强碱性) | Western一抗二抗 清除剂(弱碱性) | Western一抗二抗 清除剂(中性) | Western一抗二抗 清除剂(酸性) |
pH | 强碱性 | 弱碱性 | 中性 | 酸性 |
对于膜上蛋白的保留效果 | 好 | 好 | 好 | 好 |
对于一抗二抗的去除效果 | 好 | 好 | 好 | 好 |
去除一抗二抗所需时间 | 15~20分钟 | 20~30分钟 | 20~30分钟 | 40~80分钟 |
适用膜的类型 | PVDF和NC | PVDF和NC | 仅PVDF | PVDF和NC |
腐蚀性 | 强 | 弱 | 无 | 弱 |
用于普通的Western检测时蛋白膜上一抗二抗的去除可以任选一种去除液。如果是NC膜,即硝酸纤维素膜时,不宜选用YT073。从时间角度考虑,强碱性、弱碱性和中性的去除液所需的时间都比较短,可以优先考虑。从价格因素考虑,强碱性的去除液性价比最高。从安全性考虑,中性的去除液由于没有腐蚀性而表现出更高的安全性。弱碱性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正确操作,并进行适当防护,使用强碱性的一抗二抗去除液也是完全可行的。
对于特定的抗原和抗体,很难说哪一种Western一抗二抗去除液的效果最好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳时,可以考虑适当延长一抗二抗去除液的孵育时间,同时确保孵育时的温度不低于20℃。温度过低时一抗二抗的去除效果会下降。同时也可以考虑尝试其它的一抗二抗去除液,以摸索出最佳的适合您实验条件的Western一抗二抗去除液。
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