产品货号:
SNM228
中文名称:
甘油三酯测定试剂盒(单试剂GPO-PAP法,酶标仪及生化分析仪)
英文名称:
Triglyceride assay kit
产品规格:
96T(25ml)
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒采用GPO-PAP酶法配制,用于体外测定甘油三酯含量,适用于各型酶标仪。
生成的醌类化合物颜色的深浅与甘油三酯的含量成正比,分别测定标准管和样本管的吸光度值,可计算样本中甘油三酯的含量。
保存:2~8℃,避光,有效期1年。
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生成的醌类化合物颜色的深浅与甘油三酯的含量成正比,分别测定标准管和样本管的吸光度值,可计算样本中甘油三酯的含量。
- 试剂空白管吸光度:≤0.200(光径0.5cm)
- 线性:0~9.04mmol/L范围内,r2>0.995
- 准确度:相对偏差≤10%
- 灵敏度:测试2.26mmol/L被测物时,吸光度值△A在0.1800~0.2500之间。
- 重复性:测量精密度≤5.0%,批间差≤8.0%。
- 稳定性:未开封在2~8℃避光保存,有效期为1年。开启后2~8℃避光可稳定一个月。
组分 | 规格 | 成分 | 浓度 |
工作液(酶剂) | 25mL | Tris-HCL缓冲液 | 100mmol/L |
脂肪酶 | ≥3000U/L | ||
ATP | 0.5mmol/L | ||
甘油激酶 | ≥1000U/L | ||
3-磷酸甘油氧化酶 | ≥5000U/L | ||
过氧化物酶 | ≥1000U/L | ||
4-氨基安替比林 | 1.4mmol/L | ||
对氯酚 | 3mmol/L | ||
校准品 | 0.1mL | 甘油 | 见标签 |
96孔平底酶标板(赠品) | 一块 | - | - |
保存:2~8℃,避光,有效期1年。
- 本制品仅用于科研,不得用于临床诊断,切勿服用。
- 样品含量如超出检测范围上限时,可用生理盐水稀释样本后进行测定,测定结果乘以稀释倍数。
- 试剂防止葡萄糖、胆固醇等试剂的污染。
- 试剂与样本量可按照全自动生化分析仪的要求,按照1∶100的比例增减。
- 测定样本时若测定OD值大于0.5,请将样本稀释后测定。
- 样本处理:
- 血清(浆):直接测定,如超过线性范围用生理盐水稀释后测定。
- 培养液样本:吸取培养液,1000转/分,离心10分钟,取上清测定。
- 一般建议细胞密度在100万个/mL以上。
- 组织样本:准确称取组织重量,按重量(g)∶体积(mL)=1∶9的比例,加入9倍体积的匀浆介质,冰水浴条件下机械匀浆,2500转/分,离心10分钟,取上清液待测。
- 如组织样本为非高脂样本,匀浆介质用磷酸盐缓冲液(0.1mol/L pH7.4)或生理盐水(0.9%)进行提取;如组织样本为高脂样本或部分为高脂样本,匀浆介质可统一用无水乙醇进行提取。
- 细胞样本:
- 细胞收集:将制备好的细胞悬液取出,1000转/分,离心10分钟,弃上清液,留细胞沉淀;用等渗缓冲液(推荐0.1mol/L、pH7.0~7.4磷酸盐缓冲液)清洗1~2次,同样1000转/分,离心10分钟,弃上清液,留细胞沉淀。
- 细胞破碎:加入0.2~0.3mL的匀浆介质(推荐0.1mol/L pH7~7.4磷酸盐缓冲液或生理盐水)进行匀浆,冰水浴条件下超声破碎(功率:300W,3~5秒/次,间隔30秒,重复3~5次)或手动匀浆,制备好的匀浆液不离心直接测定。也可采用裂解液裂解(推荐TritonX-100,1~2%,裂解30~40分钟),裂解好的液体不离心直接测定。
- 建议细胞密度在100万个/mL以上。破碎好的液体可显微镜观察细胞是否破碎完全。
- 细胞收集:将制备好的细胞悬液取出,1000转/分,离心10分钟,弃上清液,留细胞沉淀;用等渗缓冲液(推荐0.1mol/L、pH7.0~7.4磷酸盐缓冲液)清洗1~2次,同样1000转/分,离心10分钟,弃上清液,留细胞沉淀。
- 血清(浆):直接测定,如超过线性范围用生理盐水稀释后测定。
- 操作表:
成分 空白孔 标准孔 样本孔 蒸馏水 2.5μL 校准品 2.5μL 样本 2.5μL 工作液 250μL 250μL 250μL 震荡孔板混匀,37℃孵育10分钟,波长510nm,酶标仪测定各孔吸光度值。
- 血清等液体样本
- 计算公式:
C标准:标准品浓度,mmol/L。甘油三酯含量
(mmol/L)= A样本孔-A空白孔 ×C标准 A标准孔-A空白孔 - 举例说明:
例1、取正常人血浆2.5μL,按操作表操作,得空白孔吸光度0.0573,校准孔吸光度0.2340,样本孔吸光度0.1283,则计算如下:
例2、取大鼠血浆2.5μL,按操作表操作,得空白孔吸光度0.0573,校准孔吸光度0.2340,样本孔吸光度0.1030,则计算如下:甘油三酯含量
(mmol/L)= 0.1283 - 0.0573 ×2.26 =0.9081mmol/L 0.2340 - 0.0573 甘油三酯含量
(mmol/L)= 0.1030 - 0.0573 ×2.26 =0.5848mmol/L 0.2340 - 0.0573
- 计算公式:
- 组织、细胞样本
- 计算公式:
- 用PBS或生理盐水作匀浆介质提取样本计算方法(此方法需要另外测定匀浆液蛋白浓度):
Cpr:待测组织样本匀浆蛋白浓度,gprot/L。(prot指蛋白)测定蛋白浓度的试剂盒可选购总蛋白定量测定试剂盒(带标准:BCA法)(微板法)(货号:SNM079)。甘油三酯含量
(mmol/gprot)= A样本孔-A空白孔 ×C标准÷Cpr A标准孔-A空白孔 - 用无水乙醇作匀浆介质提取样本计算方法(此方法不需要另外测定匀浆液蛋白浓度):
W:组织重量(g);V提取液:加入的提取液(乙醇)的总体积,L。甘油三酯含量
(mmol/g鲜重)= A样本孔-A空白孔 ×C标准÷ W A标准孔-A空白孔 V提取液
注:细胞样本测定时可将上式中的W/V提取液替换为细胞前处理时的细胞密度。
- 用PBS或生理盐水作匀浆介质提取样本计算方法(此方法需要另外测定匀浆液蛋白浓度):
- 举例说明:
例:取10%小鼠肝匀浆2.5μL,按操作表操作,得空白孔吸光度0.0580,校准孔吸光度0.2352,样本孔吸光度0.1583,同时测得10%小鼠肝匀浆蛋白浓度为12.0121gprot/L,则计算如下:甘油三酯含量
(mmol/gprot)= 0.1583 - 0.0580 ×2.26÷12.0121=0.1065mmol/gprot 0.2352 - 0.0580
- 计算公式:
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