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通常TMB显色试剂由多个组分构成，必须在使用前进行配制，并且容易产生沉淀，使用相对不便且容易导致检测结果不稳定。本品采用全新的TMB显色技术，将所有相关试剂全部配在一个溶液，即仅由单一溶液组成，不仅简化了操作步骤，而且使检测结果更加稳定可靠。

本制品专门为免疫印迹实验而设计，其在反应位点处产生紫色不可溶物，背景很少或几乎无背景，用水可终止显色反应。适合用于膜印迹免疫实验，包括WB，斑点杂交，Southern Blot和Northern Blot等HRP的膜显色检测。

• 本品含TMB和H2O2，对人体有刺激性，请注意防护。
  
• 如发现本品出现浑浊或颜色变为蓝色，请停止使用。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 使用之前，取出适量单组份TMB显色液，使其回到室温再开始使用；
  
• 参考相应实验步骤，在与HRP标记的抗体孵育一段时间后，用适当洗涤液洗涤3～5次，每次3～5min。
  
• 洗涤完毕后，去除洗涤液，滴加适量单组份TMB显色液充分覆盖膜。
  
• 室温避光孵育5～30min或更长时间（可长达数小时），直至显色到预期深浅。
  
  • 建议根据实验需求选择显色时间。
• 直接拍照记录。

• 背景显色太深
  
  • 如果背景（没有样品的对照）显色太深，一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭，如商业化封闭液或者和一抗相同来源的血清（10%）进行封闭。另一方面，使用经过适当吸附的二抗，以减小二抗的非特异性吸附。
    
  • 可以考虑缩短显色时间，或降低二抗浓度。另外，选择适当强度的洗涤液，或延长洗涤时间也会有所帮助。
• 没有显色或显色太弱
  
  • 适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果，滴一滴稀释二抗在离心管内，检测二抗是否被正常显色。
    
  • 可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系，例如生物素检测体系。
    
  • 可以适当延长显色时间。
    
  • 如果上述改进不能获得预期效果，对于WB，可以考虑更换效果更好的一抗；对于Southern、Northern Blot等可考虑更换探针。