产品货号:
GS4947
中文名称:
FITC免疫荧光检测试剂盒(兔IgG,绿色荧光)
英文名称:
FITC Immunofluorescence Detection Kit(Rabbit IgG)
产品规格:
100T|300T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒含有FITC标记的驴抗兔IgG(H+L)抗体,可以用于检测兔来源的相应一抗,在荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下可以观察到鲜艳的绿色。
FITC是一种常用的绿色荧光探针。FITC的吸收(激发)和发射峰分别为492nm和520nm。
- 本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液,可以使荧光更加持久。
- 操作简便,灵敏度高。
组分 | 100T | 300T |
封闭液 | 10mL | 30mL |
驴抗兔FITC标记二抗 | 100μL | 300μL |
免疫荧光染色二抗稀释液 | 30mL | 90mL |
抗荧光淬灭封片液 | 3mL | 10mL |
保存:驴抗兔FITC标记二抗和抗荧光淬灭封片液-20℃避光保存,其它试剂2~8℃保存,保质期12个月。
- 荧光物质均易发生淬灭,染色后需尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存,但随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。
- 如果观察时发现荧光过弱,可以适当提高一抗的浓度或适当提高荧光标记抗体的浓度。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 免疫荧光染色的准备工作
荧光标记二抗的稀释:将荧光标记的二抗按照1:50~200的比例用本试剂盒提供的免疫荧光染色二抗稀释液进行稀释。根据荧光的强弱,其稀释比例可以适当地提高或降低。 - 贴壁细胞
- 细胞爬片,PBST洗3次,每次5min。
- 加入1mL预冷的固定液,室温固定10min或更长时间。
- PBST洗3次,每次5min。
- 0.1-0.5%Triton X-100室温通透10~15min。
- PBST洗3次,每次5min。
- 封闭液室温封闭30~45min。
- 一抗室温孵育60min,为增强与一抗的结合,建议4℃孵育过夜,次日室温孵育60min。
- PBST洗4次,每次5min。
- 加入50μL稀释的荧光标记的二抗,避光孵育45~60min。
- PBST洗3次,每次5min,期间适当注意避光操作。
- 如有需要可进行DAPI或Hoechst复染细胞核。
- 抗荧光淬灭封片液封片,指甲油密封盖玻片。
- 荧光显微镜下可以观察到绿色的荧光。
- 细胞爬片,PBST洗3次,每次5min。
- 悬浮细胞
- 离心收集细胞样品于1.5mL离心管中,去掉上清后轻轻弹散细胞。
- 加入0.5mL固定液,混悬细胞,固定10min或更长时间。
- 离心去除固定液,PBST洗3次,每次5min。
- 0.1-0.5%Triton X-100室温通透10~15min。
- PBST洗3次,每次5min。
- 最后一次离心后吸除大部分液体并保留50μL液体,再缓缓悬起细胞,滴加至防脱载玻片上,尽量使细胞分布均匀。
- 稍晾干,使细胞贴在载玻片上不易随液体流动。
- 封闭液室温封闭30~45min。
- 一抗室温孵育60min,为增强与一抗的结合,建议4℃孵育过夜,次日室温孵育60min。
- PBST洗4次,每次5min。
- 加入50μL稀释的荧光标记的二抗,避光孵育45~60min。
- PBST洗3次,每次5min,期间适当注意避光操作。
- 如有需要可进行DAPI或Hoechst复染细胞核。
- 抗荧光淬灭封片液封片,指甲油密封盖玻片。
- 荧光显微镜下可以观察到绿色的荧光。
- 离心收集细胞样品于1.5mL离心管中,去掉上清后轻轻弹散细胞。
- 冰冻切片
- 用固定液固定10min或更长时间。
- PBST洗3次,每次5min。
- 封闭液室温封闭30~45min。
- 一抗室温孵育60min,为增强与一抗的结合,可以4℃孵育过夜,次日室温孵育60min。
- PBST洗4次,每次5min。
- 加入50μL稀释的荧光标记的二抗,避光孵育45~60min。
- PBST洗3次,每次5min,期间适当注意避光操作。
- 如有需要可进行DAPI或Hoechst复染细胞核。
- 抗荧光淬灭封片液封片,指甲油密封盖玻片。
- 荧光显微镜下可以观察到绿色的荧光。
- 用固定液固定10min或更长时间。
- 石蜡切片
- 切片常规脱蜡至水。
- 根据每一种抗体的要求,对组织进行相应的抗原修复,也可选用本公司生产的抗原修复液。
- PBST洗3次,每次5min。
- 封闭液室温封闭30~45min。
- 一抗室温孵育60min,为增强与一抗的结合,可以4℃孵育过夜,次日室温孵育60min。
- PBST洗4次,每次5min。
- 加入50μL稀释的荧光标记的二抗,避光孵育45~60min。
- PBST洗3次,每次5min,期间适当注意避光操作。
- 如有需要可进行DAPI或Hoechst复染细胞核。
- 抗荧光淬灭封片液封片,指甲油密封盖玻片。
- 荧光显微镜下可以观察到绿色的荧光。
- 切片常规脱蜡至水。
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