产品货号:
ME0015
中文名称:
miRNA反转录试剂盒(染料法)
英文名称:
DIOG miRNA Stem-loop RT Kit
产品规格:
25T|50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒采用高效的基因工程优化的逆转录酶,可大幅提升miRNA RT反应的效率。特别设计的茎环引物能够特异性地互补结合目的miRNA,通过RT反应获得加长的miRNA cDNA,该加长cDNA不仅可用于染料法qPCR,还可用于探针法qPCR,后续检测非常方便。DIOG miRNA茎环法逆转录试剂盒可与百奥莱博DIOG miRNA茎环染料法荧光定量PCR试剂盒(货号:ME0016)配套使用。
- 高效的基因工程优化的逆转录酶,可大幅提升miRNA RT反应的效率;
- 特别设计的茎环引物能够特异性地反转录目的miRNA,获得加长的miRNA cDNA,不仅可用于染料法qPCR,也可用于探针法qPCR。
组分 | 25T | 50T |
DIOG RTase Mix | 50μL | 100μL |
2×RT Buffer | 250μL | 500μL |
RNase-free ddH2O | 500μL | 1mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃,避免反复冻融,有效期1年。
- 用于RT反应的器具和水应进行RNase灭活处理,操作人员应佩戴口罩、手套等,以防RNase污染。
- 模板RNA使用量:Total RNA可在10pg~1μg之间。
- 试剂配制过程建议在碎冰上进行,DIOG RTase Mix粘度较大,应缓慢吸取,Tip头不要插入液体太深,以免粘染太多酶液。
- RT反应液配制:
- 取RNase-free离心管,配制如下混合液:
成分 用量 DIOG RTase Mix 2μL 2×RT Buffer 10μL Stem-loop primer(2μM) 1μL Total RNA 10pg~1μg RNase-free ddH2O 至20μL - 轻轻混匀,5000rpm离心5s。
- 取RNase-free离心管,配制如下混合液:
- cDNA合成反应:
温度 时间 25℃ 5min 50℃ 15min 85℃ 5min - 反应完毕后,5000rpm离心5s,尽快放于冰上,直接进行PCR反应,如暂时不用,请放置于-20℃以下温度,在半年内使用完毕,不要反复冻融。
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