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YPD Plus液体培养基图片
产品货号:
KD2207
中文名称:
YPD Plus液体培养基
英文名称:
YPD Plus Liquid Medium
产品规格:
50mL|100mL|250mL|500mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

用LiAc转化法进行酵母转化时,通常会通过加入Carrier DNA,选用对数期的酵母菌,以及优化质粒DNA的质量和浓度等方法来提高转化效率。在完成转化操作后,将转化产物用YPD Plus Liquid Medium重悬培养30~60分钟,有助于酵母细胞复苏,可以有效提高转化效率50~100%。适用于转化酵母菌株Y2HGold、AH109或Y187等,尤其适合对转化效率要求更高的文库转化。


我公司推出的三款转化试剂盒,转化效率为:经典转化KitKD0256)≈Super转化KitKD2195)>快速转化KitKD2251),其中经典转化Kit转化效率可达103~105 cfu/μg,快速转化Kit转化效率可达经典转化效率的50~80%,转化产物增加YPD Plus复苏培养步骤,会在此基础上显著增加转化效率。




组分50mL100mL250mL500mL
YPD Plus Liquid Medium25mL×225mL×425mL×1025mL×20
说明书1份



以经典转化方法为例,参考KD0256
  • 质粒转化:
    • 在含有约1μg质粒的1.5mL无菌离心管中,加入5μL预变性的Carrier DNA(KD2196),50μL酵母感受态细胞,350μL LiAc/PEG3350混合液(KD0803)轻柔混匀。
    • 30℃水浴或者金属浴30min,每10min轻柔上下颠倒混匀一次。
    • 每管加入20μL DMSO,轻柔上下颠倒混匀。
    • 42℃水浴热激15min,每5min轻柔上下颠倒混匀一次。
    • 3,000rmp离心5min,弃掉上清。
    • 菌体沉淀用1mL YPD Plus Liquid Medium重新悬浮,30℃摇床震荡培养30~60min。
    • 3,000rmp离心5min,弃掉上清,加入1mL无菌0.9% NaCl重悬菌体。
    • 分别稀释10倍,100倍后涂布于相应的缺陷型培养基平板上。
    • 平板倒置30℃恒温培养3~5天。
  • 文库转化:
    • 在含有约5~15μg文库质粒的15mL无菌离心管中,加入20μL预变性的Carrier DNA,600μL酵母感受态细胞,2.5mL LiAc/PEG3350混合液轻柔混匀。
    • 30℃水浴45min,每10min轻柔上下颠倒混匀一次。
    • 每管加入160μL DMSO,轻柔上下颠倒混匀。
    • 42℃水浴热激20min,每5min轻柔上下颠倒混匀一次。
    • 3,000rmp离心5min,弃掉上清。
    • 菌体沉淀用3mL YPD Plus Liquid Medium重新悬浮,30℃摇床震荡培养90min。
    • 3,000rmp离心5min,弃掉上清,根据实验需求加入相应体积的无菌0.9% NaCl重悬菌体。
    • 涂布于相应的缺陷型培养基平板上。
    • 平板倒置30℃恒温培养3~5天。

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