干血斑基因组DNA提取试剂盒(磁珠法)

产品货号：

WH0119

中文名称：

干血斑基因组DNA提取试剂盒(磁珠法)

英文名称：

Magnetic Blood Spots DNA Extraction Kit

产品规格：

50次|200次|1000次

发货周期：

1～3天

产品价格：

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本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和独特的缓冲液系统，从干血斑中分离纯化高质量基因组DNA。独特包埋的磁珠，在一定条件下对核酸具有很强的亲和力，而当条件改变时，磁珠释放吸附的核酸，能够达到快速分离纯化核酸的目的。整个过程安全、便捷，提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠，尤其适合高通量工作站的自动化提取。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

产品特点

简便快捷：1h内即可获得超纯的基因组DNA。
高通量：可整合移液法自动化仪器和磁棒法自动化仪器进行高通量提取实验
安全无毒：无需酚/氯仿等试剂
纯度高：获得的DNA纯度高，可直接用于芯片检测、高通量测序等实验。

组分	50次	200次
缓冲液GAS	25mL	100mL
缓冲液GHC	20mL	80mL
去蛋白液PD	120mL	2×240mL
漂洗液PWB	15mL	50mL
Proteinase K	1mL	3×1mL
磁珠悬浮液G	0.5mL	2×1mL
洗脱缓冲液TBC	15mL	30mL

储存条件：室温（15～25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2～8℃。2～8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中孵育10min，以溶解沉淀。

注意事项

本产品适用于手工提取或自动化仪器整合。
自备试剂：异丙醇，乙醇
若缓冲液GAS、缓冲液GHC中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。

使用前请先在缓冲液GHC中加入异丙醇，漂洗液PWB中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶子上的标签。

一、手工操作步骤

样本处理：向1.5mL离心管中加入3～10片直径为3mm的干血斑样品，加入200～400μL的缓冲液GAS和15μL Proteinase K溶液。
干血斑片数缓冲液GAS
3片 200μL
5片 300μL
10片 400μL
涡旋震荡10sec混匀后，放入预热至75℃的恒温震荡器中，900rpm恒温震荡裂解45min。
注意：当样本数目比较大时，可以将缓冲液GAS和Proteinase K按比例预先混合，混合后放置不要超过1h。
在上一步样品裂解期间，向新的离心管中加入10μL磁珠悬浮液G，600μL缓冲液GHC（使用前请确认是否已加入异丙醇），抽打混匀或振荡混匀10sec。
注意：当样本数目比较大时，可以将磁珠悬浮液G，缓冲液GHC按比例预先混合并抽打或振荡混匀20sec，混合后每个样本用量为610μL。
样品裂解后，将步骤2中离心管短暂离心后室温放置2min，并将裂解液上清转移至步骤3中的离心管，然后将其放入恒温振荡器，室温900rpm震荡10min。
注意：尽量不要吸到滤纸片，否则会影响到磁珠与核酸结合，导致得率降低。
将离心管放置于磁力架上静置1min，待磁珠完全吸附时小心去除液体。
将离心管从磁力架上取下，加入900μL去蛋白液PD，抽打混匀或振荡混匀2min。
将离心管放置于磁力架上静置1min，待磁珠完全吸附时小心去除液体。
将离心管从磁力架上取下，加入900μL去蛋白液PD，抽打混匀或振荡混匀2min。
将离心管放置于磁力架上静置1min，待磁珠完全吸附后小心去除液体。
将离心管从磁力架上取下，加入900μL漂洗液PWB（使用前请确认是否已加入无水乙醇），抽打混匀或振荡混匀2min。
将离心管放置于磁力架上静置1min，待磁珠完全吸附后小心去除液体。将离心管放置于磁力架上静置30sec，磁珠完全吸附后，小心吸去液体。
将离心管于磁力架上，室温晾干10～15min。
注意：乙醇残留会抑制后续的酶反应，所以晾干时要确保乙醇挥发干净。但也不要干燥太长时间，以免难以洗脱DNA。
加入30～50μL洗脱缓冲液TBC或去离子水，抽打混匀或振荡混匀，置于56℃，孵育5～10min。
将离心管放置于磁力架上静置2min，待磁珠完全吸附时小心将DNA溶液转移至新的离心管，并于适当条件保存。

DNA浓度及纯度检测

得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40μg/ml单链DNA。
OD260/OD280比值应为1.7～1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。

干血斑片数	缓冲液GAS
3片	200μL
5片	300μL
10片	400μL

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