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本试剂盒采用特殊的脱蜡方式和裂解条件释放组织切片中的DNA，从最大程度上减少了因福尔马林交联对DNA的损伤。此外，采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统进行FFPE DNA提取。整个过程不涉及有机试剂二甲苯，安全可行、简单快速；提取的基因组完整性好，纯度高，质量稳定可靠。

• 方便快捷：整个操作过程在1h内完成。
  
• 安全可行：不涉及二甲苯等有机试剂，无毒无害。
  
• 经济高效：无需蛋白酶K消化，独特的裂解液和特异的吸附柱提取高纯度的DNA。

• PCR和荧光定量PCR。
  
• SNP基因分析和STR基因分析。
  
• 药物基因组学研究。

• 拿到样品后要尽快在4～10%的福尔马林中固定，固定时间以8~24h为宜，时间过长导致基因组断裂，影响下游实验。
  
• 确保包埋前的样品彻底脱水，残留的福尔马林会抑制PCR检测酶的作用。
  
• 第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇!所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
  
• 本制品所提DNA的完整性依赖于样本类型、储存时间以及固定条件。如果甲醛固定时间过长或样本存放时间过久(>1年)则易导致DNA完整性受损，无法扩出长片段。
  
• 若裂解液GL、缓冲液GD中有沉淀，使用前可在37℃水浴中预热10min以溶解沉淀，不影响效果。
  
• 试剂盒中各试剂在使用前应按照说明书要求操作。
  
• DNA含量极低的石蜡包埋组织样本推荐使用石蜡包埋组织DNA提取试剂盒(二甲苯脱蜡)进行提取。

• 样本处理
  
  • 石蜡切片：取石蜡切片（5～10μm厚，1×1cm2大小）5～8张。
    
  • 石蜡块：手术刀刮取约30mg的组织样本（尽量去除多余的石蜡）。
    
    • 如果样品表面暴露于空气中，最初刮取的2～3片弃掉不用。
  • 福尔马林等固定液中的样本：取30mg样本，用手术刀切为数块，置于1.5mL离心管中，加入500μL PBS （10mM，pH7.4)涡旋振荡混匀12000rpm（~13400×g)室温离心1min，弃上清，重复3次。
• 将样本装于1.5mL无菌离心管中，加入500μL裂解液GL，再加入50μL缓冲液GP，剧烈涡旋10sec。
  
• 98℃孵育30min，期间颠倒混匀3次，直至样品完全溶解。
  
  • 水浴请用长镊子操作。
• 12000rpm（~13400×g)室温离心5min。
  
• 使用200μL枪头沿管壁小心吸取中间层的水相清液于新的离心管中（上层是石蜡及蛋白混合物，下层为少许杂质沉淀，如果分层不彻底可以延长离心时间，直到上层混合物和水相清液很好的分开）。
  
• （可选步骤）如果要去除RNA，可以将样品中加入2μL RNase A（100mg/mL），室温孵育2min后，进行下一步操作。
  
• 加入2倍体积的无水乙醇（例：450μL水相清液加入900μL无水乙醇），充分混匀，静置3min。
  
• 将上一步所得的混合液加入一个吸附柱CR2中，8000rpm（~6000×g)室温离心2min，倒掉收集管中的废液，重新将吸附柱放回收集管中。
  
  • 吸附柱最大容量为700μL，可将剩余液体重复上述步骤上柱。
• 向吸附柱CR2中加入500μL缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），8000rpm（~6000×g)室温离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
  
• 向吸附柱CR2中加入600μL漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），8000rpm（~6000×g)室温离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
  
• 重复操作步骤10。
  
• 将吸附柱CR2放回收集管中，12000rpm（~13400×g)，离心2min，倒掉废液。将吸附柱开盖置于室温放置2～5min，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
  
  • 乙醇残留会抑制后续的酶反应，所以晾干时要确保乙醇挥发干净。但也不要干燥太长时间，以免难以洗脱DNA。
• 将吸附柱CR2转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加65℃预热的30～100μL洗脱缓冲液TE或ddH2O洗脱，室温放置2～5min，12000rpm （~13400×g)离心2min，将收集有DNA的离心管-20℃保存。
  
  • 洗脱缓冲液体积不应少于30μL，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CR2中，室温放置2min，12000rpm（~13400×g)离心2min。洗脱液的pH对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0～8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。