微量样本DNA提取试剂盒(磁珠法)

产品货号：

WE0505

中文名称：

微量样本DNA提取试剂盒(磁珠法)

英文名称：

Magbead Micro Sample DNA Kit

产品规格：

96T

发货周期：

1～3天

产品价格：

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本试剂盒提供了一种简单、快速、高效的从微量样本中提取DNA的方法，适用于新鲜或冷冻的动物组织、毛发、指甲、微量血液、微量唾液、尿液、骨骼、牙齿等多种样本。细胞裂解后，DNA结合于硅基包被磁珠表面。漂洗后，高纯度的DNA洗脱于去离子水中。纯化得到的DNA纯度好，完整度高。可以直接用于PCR、Real-time PCR、SNP基因分型、STR基因分型、二代测序等下游实验。

组分	规格
Buffer SL	60mL
Buffer GL	25mL
Buffer GW1（concentrate）	80mL
Buffer GW2（concentrate）	50mL
RNase-Free Water	10mL
Proteinase K	2×25mg
Proteinase K Storage Buffer	2×1.25mL
Magbeads PN	2×1mL

保存：室温

第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
使用前请检查Buffer SL、Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer SL、Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
Magbeads PN严禁冰冻和高速离心，否则可能会对Magbeads PN造成不可逆的损害。Magbeads PN每次使用时请充分振荡混合均匀。
向Proteinase K中加入1.25mL Proteinase K Storage Buffer使其溶解，-20℃保存。配制好的Proteinase K勿长时间室温放置，以免影响其活性。

一、微量血液或唾液样本

取约1～10μL的血液或唾液置于离心管（自备）中，加入180μL Buffer SL、200μL Buffer GL和20μL Proteinase K，涡旋震荡10秒。
置于恒温孵育器80℃、1200rpm孵育10分钟后取下。
加入200μL异丙醇与20μL磁珠后涡旋震荡混匀5秒钟，之后将离心管固定于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合10分钟。
将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
向离心管中加入500μL Buffer GW1（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
- 如需提高纯度，可重复步骤5。
向离心管中加入500μL Buffer GW2（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
重复步骤6。
离心管短暂离心后，将其重新固定于磁力架上用移液器去除管底溶液，之后开盖室温放置5～10分钟使乙醇充分挥发。
向离心管中加入50～100μL RNase-Free Water后涡旋震荡使磁珠充分悬浮于洗脱液中，之后将离心管固定于56℃、1600rpm的恒温混匀上震荡洗脱10分钟。
将离心管固定于磁力架上静置2分钟，之后将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。

二、毛发或指甲样本

样本处理：
- 毛发样本：取约1-5cm发根部（带毛囊）的样本，剪成0.5-1cm的小段，置于离心管中，加入180μL Buffer SL，20μL Proteinase K涡旋震荡混匀。置于恒温孵育器56℃、1200rpm孵育至少1小时，形成Lysate。
- 指甲样本：取10～100mg左右接近皮肤部位的指甲样本，剪碎（或用液氮研磨）后置于离心管中，加入180μL Buffer SL，20μL Proteinase K涡旋震荡混匀。置于恒温孵育器56℃、1200rpm孵育至少1小时，形成Lysate。
加入200μL Buffer GL后涡旋震荡使溶液混匀，置于恒温孵育器70℃、1200rpm孵育10分钟后取下。
- 加入Buffer GL之后有沉淀为正常现象。
加入200μL异丙醇与20μL磁珠后涡旋震荡混匀5秒钟，之后将离心管固定于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合10分钟。
将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
向离心管中加入500μL Buffer GW1（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
- 如需提高纯度，可重复步骤5。
向离心管中加入500μL Buffer GW2（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
重复步骤6。
离心管短暂离心后，将其重新固定于磁力架上用移液器去除管底溶液，之后开盖室温放置5～10分钟使乙醇充分挥发。
向离心管中加入50～100μL RNase-Free Water后涡旋震荡使磁珠充分悬浮于洗脱液中，之后将离心管固定于56℃、1600rpm的恒温混匀上震荡洗脱10分钟。
将离心管固定于磁力架上静置2分钟，之后将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。

三、拭子样本

样本处理：
- 湿拭子：取10～100μL存放拭子的保存液，置于离心管中，加入180μL Buffer SL，20μL Proteinase K涡旋震荡混匀。置于恒温孵育器56℃、1200rpm孵育1小时，形成Lysate。
- 干拭子：将拭子用剪刀从杆上剪下，置于离心管中，加入360μL Buffer SL，20μL Proteinase K涡旋震荡混匀。置于恒温孵育器56℃、1200rpm孵育1小时，形成Lysate。
加入200μL Buffer GL后涡旋震荡使溶液混匀，置于恒温孵育器70℃、1200rpm孵育10分钟后取下。
- 加入Buffer GL之后有沉淀为正常现象。
加入200μL异丙醇与20μL磁珠后涡旋震荡混匀5秒钟，之后将离心管固定于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合10分钟。
将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
向离心管中加入500μL Buffer GW1（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
- 如需提高纯度，可重复步骤5。
向离心管中加入500μL Buffer GW2（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
重复步骤6。
离心管短暂离心后，将其重新固定于磁力架上用移液器去除管底溶液，之后开盖室温放置5～10分钟使乙醇充分挥发。
向离心管中加入50～100μL RNase-Free Water后涡旋震荡使磁珠充分悬浮于洗脱液中，之后将离心管固定于56℃、1600rpm的恒温混匀上震荡洗脱10分钟。
将离心管固定于磁力架上静置2分钟，之后将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。

四、血片或血斑样本

样本处理：
- 血片样本：取直径约3mm的血片样本1～2片，置于离心管中，加入180μL Buffer SL，20μL Proteinase K涡旋震荡混匀。置于恒温孵育器56℃、1200rpm孵育45分钟，形成Lysate。
- 血斑样本：剪取滴落在衣物或棉布上直径约6mm的血斑样本，置于离心管中，加入180μL Buffer SL，20μL Proteinase K涡旋震荡混匀。置于恒温孵育器56℃、1200rpm孵育1小时，形成Lysate。
加入200μL Buffer GL后涡旋震荡使溶液混匀，置于恒温孵育器70℃、1200rpm孵育10分钟后取下。
- 加入Buffer GL之后有沉淀为正常现象。
加入200μL异丙醇与20μL磁珠后涡旋震荡混匀5秒钟，之后将离心管固定于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合10分钟。
将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
向离心管中加入500μL Buffer GW1（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
- 如需提高纯度，可重复步骤5。
向离心管中加入500μL Buffer GW2（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
重复步骤6。
离心管短暂离心后，将其重新固定于磁力架上用移液器去除管底溶液，之后开盖室温放置5～10分钟使乙醇充分挥发。
向离心管中加入50～100μL RNase-Free Water后涡旋震荡使磁珠充分悬浮于洗脱液中，之后将离心管固定于56℃、1600rpm的恒温混匀上震荡洗脱10分钟。
将离心管固定于磁力架上静置2分钟，之后将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。

五、骨骼或牙齿样本

将骨骼或牙齿用液氮或金属研磨器研磨后取0.01～0.1g左右置于离心管中，加入260μL Buffer SL，20μL Proteinase K涡旋震荡混匀。置于恒温孵育器56℃、1200rpm孵育过夜，形成Lysate。
加入200μL Buffer GL后涡旋震荡使溶液混匀，置于恒温孵育器70℃、1200rpm孵育10分钟后取下。
- 加入Buffer GL之后有沉淀为正常现象。
加入200μL异丙醇与20μL磁珠后涡旋震荡混匀5秒钟，之后将离心管固定于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合10分钟。
将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
向离心管中加入500μL Buffer GW1（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
- 如需提高纯度，可重复步骤5。
向离心管中加入500μL Buffer GW2（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
重复步骤6。
离心管短暂离心后，将其重新固定于磁力架上用移液器去除管底溶液，之后开盖室温放置5～10分钟使乙醇充分挥发。
向离心管中加入50～100μL RNase-Free Water后涡旋震荡使磁珠充分悬浮于洗脱液中，之后将离心管固定于56℃、1600rpm的恒温混匀上震荡洗脱10分钟。
将离心管固定于磁力架上静置2分钟，之后将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。

六、组织样本

取1～10mg组织用液氮研磨后，置于离心管中，加入180μL Buffer SL，20μL Proteinase K涡旋震荡混匀。置于恒温孵育器56℃、1200rpm孵育1小时或56℃水浴过夜，形成Lysate。
加入200μL Buffer GL后涡旋震荡使溶液混匀，置于恒温孵育器70℃、1200rpm孵育10分钟后取下。
- 加入Buffer GL之后有沉淀为正常现象。
加入200μL异丙醇与20μL磁珠后涡旋震荡混匀5秒钟，之后将离心管固定于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合10分钟。
将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
向离心管中加入500μL Buffer GW1（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
- 如需提高纯度，可重复步骤5。
向离心管中加入500μL Buffer GW2（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
重复步骤6。
离心管短暂离心后，将其重新固定于磁力架上用移液器去除管底溶液，之后开盖室温放置5～10分钟使乙醇充分挥发。
向离心管中加入50～100μL RNase-Free Water后涡旋震荡使磁珠充分悬浮于洗脱液中，之后将离心管固定于56℃、1600rpm的恒温混匀上震荡洗脱10分钟。
将离心管固定于磁力架上静置2分钟，之后将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。

七、烟头或果壳样本

样本处理：
- 烟头样本：取1～3张1cm2烟头外层纸剪碎，置于离心管中，加入180μL Buffer SL，20μL Proteinase K涡旋震荡混匀。置于恒温孵育器56℃、1200rpm孵育1小时或56℃水浴过夜，形成Lysate。
- 果壳样本：取1～3片果壳碎片，置于离心管中，加入180μL Buffer SL，20μL Proteinase K涡旋震荡混匀。置于恒温孵育器56℃、1200rpm孵育1小时或56℃水浴过夜，形成Lysate。
加入200μL Buffer GL后涡旋震荡使溶液混匀，置于恒温孵育器70℃、1200rpm孵育10分钟后取下。
- 加入Buffer GL之后有沉淀为正常现象。
加入200μL异丙醇与20μL磁珠后涡旋震荡混匀5秒钟，之后将离心管固定于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合10分钟。
将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
向离心管中加入500μL Buffer GW1（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
- 如需提高纯度，可重复步骤5。
向离心管中加入500μL Buffer GW2（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
重复步骤6。
离心管短暂离心后，将其重新固定于磁力架上用移液器去除管底溶液，之后开盖室温放置5～10分钟使乙醇充分挥发。
向离心管中加入50～100μL RNase-Free Water后涡旋震荡使磁珠充分悬浮于洗脱液中，之后将离心管固定于56℃、1600rpm的恒温混匀上震荡洗脱10分钟。
将离心管固定于磁力架上静置2分钟，之后将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。

八、尿液样本

将1～20mL尿液4000rpm离心10min弃去上清，留取10～200μL沉淀置于1.5mL离心管中，加入180μL Buffer SL，20μL Proteinase K涡旋震荡混匀。置于恒温孵育器56℃、1200rpm孵育45分钟，形成Lysate。
加入200μL Buffer GL后涡旋震荡使溶液混匀，置于恒温孵育器70℃、1200rpm孵育10分钟后取下。
- 加入Buffer GL之后有沉淀为正常现象。
加入200μL异丙醇与20μL磁珠后涡旋震荡混匀5秒钟，之后将离心管固定于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合10分钟。
将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
向离心管中加入500μL Buffer GW1（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
- 如需提高纯度，可重复步骤5。
向离心管中加入500μL Buffer GW2（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液（保持离心管固定于磁力架上）。
重复步骤6。
离心管短暂离心后，将其重新固定于磁力架上用移液器去除管底溶液，之后开盖室温放置5～10分钟使乙醇充分挥发。
向离心管中加入50～100μL RNase-Free Water后涡旋震荡使磁珠充分悬浮于洗脱液中，之后将离心管固定于56℃、1600rpm的恒温混匀上震荡洗脱10分钟。
将离心管固定于磁力架上静置2分钟，之后将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。

附表1：根据不同样本类型提取DNA所需的样本量和Buffer SL用量参照

样本类型	样本量	Buffer SL用量
微量血液、唾液	1～100μL左右	180μL
血片、血斑	直径3mm～6mm，1～2片	180μL
干拭子	1支	360μL
湿拭子	10～100μL	180μL
毛发（带毛囊）	发根1-5cm	180μL
指甲	0.01～0.1g左右	180μL
骨骼、牙齿	0.01～0.1g左右	260μL
组织	1～10mg左右	180μL
烟头	1～3片	180μL
尿液	1～20mL	180μL

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