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本试剂盒适用于从血浆、血清、羊水等无细胞体液中纯化回收游离DNA（Free-circulating/Cell-free DNA）。高盐时，游离DNA结合于硅基包被的磁珠表面。漂洗后，游离DNA洗脱于Buffer EB或去离子水中。游离DNA的得率与样品类型、储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠，可用于定量PCR、产前诊断等下游实验。

• 第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1中加入无水乙醇。
  
• 第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GCW2中加入无水乙醇。
  
• 若手动操作，在实验开始前将恒温混匀仪预热至60℃。
  
• Magbeads ZN严禁冰冻和高速离心，否则可能会对Magbeads ZN造成不可逆的损害。Magbeads ZN每次使用时请充分振荡混合均匀。
  
• 用前请先检查Buffer MPL和20% SDS是否出现结晶或沉淀，如有结晶或沉淀现象，可在37℃水浴几分钟，即可恢复澄清。

• 按下表向离心管中依次加入30μL Proteinase K、2mL血浆、100μL 20% SDS，放于60℃、1200rpm恒温混匀仪上震荡20分钟，孵育结束后将离心管冰浴5～10分钟。
  注：如无恒温混合仪，将离心管涡旋震荡10秒钟后放于60℃水浴锅中孵育20分钟，期间每隔7分钟涡旋震荡10秒钟。
  为避免蛋白酶K失活，请按下表试剂顺序依次加入，请勿将SDS直接加到蛋白酶K溶液中。
  

  成分	血浆体积
  	1mL	2mL	4mL	10mL
  Proteinase K	15μL	30μL	60μL	150μL
  血浆样本	1mL	2mL	4mL	10mL
  20% SDS	50μL	100μL	200μL	500μL
  总体积	1.065mL	2.13mL	4.26mL	10.65mL

• 孵育过程中，按下表准备裂解液/磁珠混合液，并混合均匀。
  

  成分	血浆体积
  	1mL	2mL	4mL	10mL
  Buffer MPL	1mL	2mL	4mL	10mL
  异丙醇	0.25mL	0.5mL	1mL	2.5mL
  Magbeads ZN	15μL	30μL	60μL	150μL
  总体积	1.265mL	2.53mL	5.06mL	12.65mL

• 将步骤2中准备的裂解液/磁珠混合液加到步骤1样本管中。涡旋震荡1分钟，然后手工上下颠倒或使用混匀仪混匀5～10分钟，使磁珠一直处于悬浮状态。
  
• 将离心管放于磁力架上静置，待磁珠吸附到磁力架上，管内溶液变澄清后，翻转离心管冲洗瓶盖上残留磁珠，再放置1分钟左右，之后弃去溶液。
  
• 向离心管中加入1mL Buffer GW1（使用前请检查是否已加入无水乙醇），震荡混匀后将混悬液转移到新的1.5mL离心管中。
  
• 将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液。
  
• 向离心管中加入1mL Buffer GW1（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。
  
• 将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液。
  
• 向离心管中加入1mL Buffer GCW2（使用前请检查是否已加入无水乙醇），涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。
  
• 将离心管固定于磁力架上静置1分钟，之后弃去溶液。
  
• 重复步骤9-10。
  
• 离心管短暂离心后，将其重新固定于磁力架上用移液器去除管底溶液，开盖室温放置5～10分钟使乙醇充分挥发。
  
• 向离心管中加入50～100μL RNase-Free Water后涡旋震荡使磁珠充分悬浮于洗脱液中，之后将离心管固定于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡洗脱10分钟。
  
• 将离心管固定于磁力架上静置2分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。