产品货号：
SV2030
中文名称：
柱式DNA纯化回收试剂盒
英文名称：
Renu Column DNA Cleanup Kit
产品规格：
50T|250T
发货周期：
已停产
产品价格：
已停产
本产品是一款快速可靠的DNA纯化试剂盒，可从酶学反应中纯化和浓缩高达5μg例如PCR、酶切、连接和反转录产物。该方法减少结合、漂洗和洗脱过程中的温育和离心时间，5分钟之内即可完成纯化实验。DNA纯化结合缓冲液用于稀释样本以确保DNA在高盐环境下结合到专有的二氧化硅基质上。DNA纯化漂洗缓冲液将酶、短链引物（≤40nt）、变性剂和其它小分子量的反应成分（如核苷酸，DMSO，甜菜碱）去除，从而实现更低体积的洗脱，得到高浓度高纯度的DNA。
保存：RT
使用前确保在洗涤缓冲液中加入4倍体积的95%乙醇，50次规格的加入20mL的95%乙醇，250次规格的加入100mL的95%乙醇。
一、典型操作步骤
二、寡核苷酸的纯化步骤
本试剂盒寡核苷酸纯化回收效率示意图：
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本试剂盒洗脱得到的DNA可以用于限制性酶切、DNA测序、连接反应和其它酶学等下游实验。
- 洗脱体积低至6μL；
- 优化设计过滤柱防止缓冲液和盐分残留。
- 流程优化，试验速度快至5分钟完成DNA纯化实验。
- PCR产物纯化
有效去除PCR产物DNA中的聚合酶、引物、洗涤剂、dNTPs等。 - 酶切反应纯化
有效去除限制酶及各种修饰酶(如连接酶、激酶、核酸酶、磷酸酶)，对DNA样品脱盐和浓缩。 - cDNA纯化
有效去除反转录酶和聚合酶以及核苷酸。 - 标记纯化
有效去除未结合的放射性标记或荧光标记的核苷酸。 - 质粒纯化
可用于纯化和浓缩质粒，有效去除抑制剂及不必要污染物。 - 寡核苷酸纯化
可用于纯化单链DNA寡核苷酸(≥18nt)，dsDNA片段(≥15bp)，可有效去除小的寡核苷酸（6～12nt）。
| 结合容量 | 多达5μg |
| 典型回收率 | 70～90%(50bp～10kb)； 50～70%(11～23kb)； 70～85%(ssDNA≥18nt，dsDNA≥15bp) |
| 洗脱体积 | ≥6μL |
| 纯度 | A260/280＞1.8； A260/230＞1.8 |
| 组分 | 50T | 250T |
| 结合缓冲液 | 47mL | 235mL |
| 洗涤缓冲液 | 5mL | 25mL |
| 洗脱缓冲液 | 3mL | 7mL |
| 离心吸附柱及收集管 | 50套 | 250套 |
保存：RT
使用前确保在洗涤缓冲液中加入4倍体积的95%乙醇，50次规格的加入20mL的95%乙醇，250次规格的加入100mL的95%乙醇。
一、典型操作步骤
- 按下表比例加入结合缓冲液。
样本类型 结合缓冲液:样本 dsDNA＞2kb(plasmids,gDNA) 2:1 dsDNA＜2kb 5:1 ssDNA(cDNA,M13) 7:1
注：- 用移液管上下搅动或轻弹管壁混匀，不要涡旋。
- 初始样本体积建议在20～100μL，样本量较少时可用TE调节体积。
- 用移液管上下搅动或轻弹管壁混匀，不要涡旋。
- 将吸附柱放入收集管，并将样本加入柱中，16000g离心1分钟，弃掉滤液。
注：离心时间可缩短至30秒以节约实验时间。 - 将吸附柱重新放入收集管。加入200μL洗涤缓冲液，16000g离心1分钟，弃掉滤液。
- 重复步骤3
- 将吸附柱转移至干净的1.5mL微滤管中。
注：确保柱尖不要接触与滤液。如果有疑虑，可重新离心1分钟，以确保微量的盐和乙醇不会进入下一步。 - 向吸附柱基质中心加入≥6μL的洗脱缓冲液，等待1分钟，然后16000g离心1分钟以洗脱DNA。
注：- 典型的洗脱体积为6～20μL。无核酸酶的水（pH7～8.5）也可用于洗脱DNA。使用更大体积的洗脱缓冲液，产量可能会略有增加，但DNA的浓度会降低。对于较大尺寸的DNA（≥10kb），使用前将洗脱缓冲液加热至50℃可提高产率。
- 应注意确保洗脱缓冲液加入到基质而不是柱壁上，以最大限度地提高洗脱效率。
- 离心时间可缩短至30秒以节约实验时间。
- 典型的洗脱体积为6～20μL。无核酸酶的水（pH7～8.5）也可用于洗脱DNA。使用更大体积的洗脱缓冲液，产量可能会略有增加，但DNA的浓度会降低。对于较大尺寸的DNA（≥10kb），使用前将洗脱缓冲液加热至50℃可提高产率。
二、寡核苷酸的纯化步骤
本试剂盒寡核苷酸纯化回收效率示意图：
- 建议初始样本体积为50μL。对于较小的样本，可以使用无核酸酶水来调节体积。
- 向50μL样本中加入100μL结合缓冲液。
- 加入300μL乙醇（≥95%），用移液管上下搅动或轻弹管壁混匀，不要涡旋。
- 将吸附柱放入收集管，并将样本加入柱中，盖上盖子，16000g离心1分钟，弃掉滤液。
注：离心时间可缩短至30秒以节约实验时间。 - 将吸附柱重新放入收集管。加入500μL洗涤缓冲液，16000g离心1分钟，弃掉滤液。
- 重复步骤5（可选）。
注：建议此步骤用于去除可能干扰下游应用的酶（例如蛋白酶K）。 - 将吸附柱转移至干净的1.5mL微滤管中。
注：确保柱尖不要接触与滤液。如果有疑虑，可重新离心1分钟，以确保微量的盐和乙醇不会进入下一步。 - 向吸附柱基质中心加入≥6μL的洗脱缓冲液，等待1分钟，然后16000g离心1分钟以洗脱DNA。
注：- 典型的洗脱体积为6～20μL。无核酸酶的水（pH7～8.5）也可用于洗脱DNA。使用更大体积的洗脱缓冲液，产量可能会略有增加，但DNA的浓度会降低。对于较大尺寸的DNA（≥10kb），使用前将洗脱缓冲液加热至50℃可提高产率。
- 应注意确保洗脱缓冲液加入到基质而不是柱壁上，以最大限度地提高洗脱效率。
- 离心时间可缩短至30秒以节约实验时间。
- 典型的洗脱体积为6～20μL。无核酸酶的水（pH7～8.5）也可用于洗脱DNA。使用更大体积的洗脱缓冲液，产量可能会略有增加，但DNA的浓度会降低。对于较大尺寸的DNA（≥10kb），使用前将洗脱缓冲液加热至50℃可提高产率。
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