植物基因组DNA提取试剂盒

产品货号：

SN0013

中文名称：

植物基因组DNA提取试剂盒

英文名称：

ColPure Plant Genomic DNA Extraction Kit

产品规格：

50T

发货周期：

1～3天

产品价格：

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简要说明：

本试剂盒采用高效结合核酸的离心柱配合独特的缓冲液系统，适合从50～100mg普通植物中提取基因组DNA。试剂盒基于硅胶柱纯化技术，提取过程中无需使用有毒的酚氯仿，整个提取过程只需30～40min，可最大限度去除植物组织中的杂质，提取的基因组DNA片段完整、纯度高，可直接用于下游PCR扩增、qPCR、分子标记以及文库构建等实验。

产品特点：

操作简便：30～40min内完成数个样品的基因组DNA提取。
安全低毒：无需酚、氯仿等有毒试剂。
DNA纯度高：提取的基因组DNA无杂质残留，适用于对纯度、完整性要求很高的下游实验。

产品组成：

组分	规格
Buffer GP1	40mL
Buffer GP2	10mL
Buffer GP3	21mL
Buffer GW2	15mL
Buffer TE	10mL
RNase A(10mg/mL)	300μL
ColPure DNA吸附柱	50套

保存：2～8℃，有效期1年。

注意事项：

第一次使用前应按照瓶上标签在Buffer GP3和Buffer GW2中分别加入27mL和60mL无水乙醇。
植物组织样品应避免反复冻融，否则会导致提取的基因组DNA片段小且得率低。
使用前请检查Buffer GP1和Buffer GP2是否出现结晶或者沉淀，如有沉淀，请置于37℃水浴溶解摇匀后使用。
本试剂盒所有离心操作均在室温下进行。

使用方法：

取植物新鲜组织50～100mg或干重组织20mg，加入液氮充分研磨。加入400μL Buffer GP1和6μL RNase A(10mg/mL)，涡旋振荡1min，室温放置10min，使其充分裂解。
加入130μL Buffer GP2，充分混匀，涡旋振荡1min。
12000rpm（~13400×g）离心5min，将上清移至新的离心管中。
加入1.5倍体积的Buffer GP3（使用前检查是否已加入无水乙醇）（例如500μL上清液加入750μL Buffer GP3），立即振荡15s充分混匀，此时可能出现絮状沉淀但不影响后续实验。
将上步所得溶液和沉淀分两次加入到ColPure DNA吸附柱中（吸附柱放入收集管中），12000rpm离心30s，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
向吸附柱中加入600μL Buffer GW2（使用前检查是否已加入无水乙醇），12000rpm离心30s，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
如吸附膜呈现绿色，向吸附柱中加入500μL无水乙醇，12000rpm离心30s，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
重复步骤6。
12000rpm离心2min，弃废液。将吸附柱开盖置于室温数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留可能会影响后续的酶反应实验（酶切、PCR等）。
将吸附柱放到一个干净离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50～200μL Buffer TE或ddH2O，室温放置2～5min，12000rpm离心2min，收集DNA溶液，如果要增加基因组DNA的得率，可以将离心得到的溶液重新加至吸附膜上，重复洗脱。将洗脱的DNA溶液置于-20℃保存。
如果下游实验对pH值或EDTA敏感，建议用ddH2O洗脱，若用ddH2O洗脱应保证其pH值在7.0～8.5（可以用NaOH将水的pH值调到此范围）；若需长期保存，推荐使用Buffer TE洗脱后置于-20℃保存。

常见问题：

柱子出现堵塞？
- 样品用量过多。建议按照说明书推荐量进行提取。
- 样品富含多糖多酚类物质。处理富含多糖多酚的组织，推荐用专用试剂盒。
- 离心温度过低。本制品使用操作均在室温下进行。
DNA提取得率低？
- 样品用量过少。建议按照说明书推荐量进行提取。
- 样品材料质量不好。尽量选用新鲜组织样品，样品采集后应液氮速冻，然后置于-80℃保存，建议尽快提取，避免反复冻融。
- 样品裂解不充分。若样品过量则适当减少样品量，加入Buffer GP1后需涡旋振荡1min使其充分混匀，可适当延长裂解时间。
提取的DNA中有RNA污染？
- 未加入RNase A消化。请按照说明书要求加入RNase A消化。
- 样品中RNA含量过多。可适当增加RNase A用量或延长消化时间。

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