产品货号:
QN4130
中文名称:
多糖多酚植物基因组DNA提取试剂盒
英文名称:
Polysaccharide Polyphenol Plant Genome Extraction Kit
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:
产品组成:
保存:室温,其中RNase A置于-20℃,有效期1年。
注意事项:
使用方法:
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本试剂盒采用特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲系统,能从多种植物组织中分离纯化高质量基因组DNA,独特的沉淀溶液可以沉淀去除多糖多酚植物样本中的蛋白质、多糖以及酚类等杂质。提取的基因组DNA纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒纯化的基因组DNA适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交、芯片检测、高通量测序等实验。
产品组成:
| 组分 | 50T | 100T |
| RNase A | 100μL×2 | 100μL×4 |
| 溶液A | 25mL | 50mL |
| 溶液B | 12.5mL | 25mL |
| 去蛋白液 | 18mL | 36mL |
| 漂洗液 | 15mL | 15mL×2 |
| 洗脱液 | 15mL | 30mL |
| 过滤柱 | 50个 | 100个 |
| 吸附柱 | 50个 | 100个 |
| 收集管 | 50个 | 100个 |
保存:室温,其中RNase A置于-20℃,有效期1年。
注意事项:
- 使用前先在漂洗液和去蛋白液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签(去蛋白液每瓶需要单独加入12mL无水乙醇,漂洗液每瓶需要单独加入45mL无水乙醇)。
- 所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
- 组织应尽量选取新鲜幼嫩样本,避免样品反复冻融,否则影响DNA提取效率和质量。
- 如果试剂盒中的试剂出现沉淀,可在65℃水浴中融化,不影响使用。
- 洗脱缓冲液的体积不能小于50μL,DNA产物应-20℃保存。
- 植物组织的研磨程度影响DNA提取效率,所以组织一定要用液氮研磨充分。
使用方法:
- 植物组织预处理:取新鲜植物组织,去掉叶脉后加入液氮充分研磨,称取植物新鲜组织约200mg或干重组织约40mg。
- 将研磨好的植物组织粉末迅速转移到预先装有500μL溶液A、4μL RNase A的离心管中,充分颠倒混匀,65℃水浴20min,水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。若裂解后溶液粘稠,可以适量加大溶液A使用量,同时在步骤3中增加缓冲液B的使用量。
- 加入250μL溶液B(溶液B用前摇匀),充分颠倒混匀,涡旋振荡1min,12000rpm离心5min,转移上清至过滤柱中(过滤柱放在收集管中),然后12000rpm离心1min,转移滤液至新的离心管中(约600~700μL)。
- 加入和上清相同体积的的无水乙醇,此时若出现絮状物,将絮状物吹散后一起加入吸附柱中,12000rpm离心5min,弃废液,一次加不完可分两次加入。如果吸附柱膜呈绿色或离心时有堵塞现象,可向吸附柱中加入600μL无水乙醇,并适当延长离心时间。
- 向吸附柱中加入550μL去蛋白液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1min,倒掉废液,将吸附柱放入收集管中。
- 向吸附柱中加入500μL漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1min,倒掉废液,将吸附柱放入收集管中。
- 重复步骤6。
- 将吸附柱放回收集管中,12000rpm离心2min,弃收集管,然后将吸附柱转移到新的离心管中,室温晾干5~10min。乙醇残留会抑制后续的酶反应,所以晾干时要确保乙醇挥发干净。但也不要干燥太长时间,以免难以洗脱DNA。
- 在吸附柱中加入50~200μL洗脱缓冲液,室温放置3~5min,12000rpm离心2min,将溶液收集到离心管中。
- (可选)离心所得洗脱液再加入吸附柱中,室温放置2min,12000rpm离心2min。
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