产品货号:
QN0929
中文名称:
DNA产物纯化试剂盒
英文名称:
DNA Purification Kit
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:
产品组成:
保存:室温,有效期1年。
注意事项:
操作步骤:
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本试剂盒采用独特的离心吸附柱纯化酶切、PCR等反应液中的DNA片段,同时除去蛋白质、其他有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒可回收100bp~10kb大小的DNA片段,回收率可达80%以上(小于100bp和大于10kb的DNA片段回收率为30~50%)。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等试验。
产品组成:
| 组分 | 50T | 100T |
| 结合液 | 30mL | 60mL |
| 漂洗液 | 15mL | 2×15mL |
| 洗脱液 | 15mL | 30mL |
| 吸附柱 | 50个 | 100个 |
| 收集管 | 50个 | 100个 |
保存:室温,有效期1年。
注意事项:
- 使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。
- 本试剂盒适用于无选择性地回收溶液中所有DNA片段(可去除50bp以下的小片段),如需选择性地回收特定片段、同时去除其他不同大小片段,请选择琼脂糖凝胶回收试剂盒。
- 回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。
- 回收小于100bp和大于10kb的DNA片段时,可适当延长吸附和洗脱的时间。
操作步骤:
- 估测PCR反应液或酶切反应液的体积,向其中加入4倍体积的结合液,充分混匀。如PCR反应体系为100L,则加入400μL结合液。如果反应液的体积较小,建议用水稀释反应液或酶切反应液至100μL,然后与400μL结合液混合。
- 将上一步所得溶液加入一个吸附柱中(吸附柱放入收集管中),室温放置2分钟,12000rpm离心30~60秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放入收集管中。吸附柱最大容积为800μL,若样品体积大于800μL可分批加入。
- 向吸附柱中加入600μL漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心30~60秒,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
- 向吸附柱中加入600μL漂洗液,12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
- 12000rpm离心2min,尽量除去漂洗液。将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,防止漂洗液中的乙醇影响后续的实验。
- 将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加30~100μL经65~70℃水浴预热的洗脱液,室温放置2min,12000rpm离心2min,收集DNA溶液。
- 为了增加回收效率,可将得到的收集液重新加入吸附柱中,12000rpm再次离心2min。
- 洗脱缓冲液体积不应少于30μL,体积过小影响回收效率。
- 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0~8.5之间。
- 为了增加回收效率,可将得到的收集液重新加入吸附柱中,12000rpm再次离心2min。
- DNA产物置于-20℃保存。
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