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本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，提取酵母基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，能够高效专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

• 使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签（每瓶需单独加入45mL无水乙醇）。
  
• 所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
  
• 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
  
• 若试剂盒中的溶液出现沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影响提取效果。
  
• 如果实验中的离心步骤出现柱子堵塞的情况，可适当延长离心时间。
  
• 洗脱缓冲液的体积最好不少于50μL，体积过小会影响回收效率；洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响，若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围)，pH值低于7.0会降低洗脱效率。DNA产物保存在-20℃，以防DNA降解。

• 取酵母细胞（不超过5×10⁷cells），8000rpm离心1min，尽量吸除上清。
  
  过夜培养酵母菌液OD值为2.0左右，离心收集菌体，用PBS洗涤尽量去除培养基。
• 酵母细胞壁的破除：向酵母菌体中加入470μL山梨醇Buffer。充分悬浮菌体，加入25μL酵母破壁酶和5μL巯基还原剂，充分混匀。30℃处理1～2h，期间可颠倒离心管混匀数次。
  
• 12000rpm离心1min，弃上清，收集沉淀。
  
• 向沉淀中加入300μL溶液A，充分悬浮沉淀，向悬浮液中加入2μL RNase A，充分颠倒混匀，室温放置10min。
  
• 加入220μL溶液B，再加入20μL的蛋白酶K，充分颠倒混匀，65℃水浴消化15～30min，消化期间可颠倒离心管混匀数次。
  
• 8000rpm离心30s，取上清。（尽快吸出，温度降至室温后会出现白色浑浊液体）
  
• 冷却至室温，加入375μL无水乙醇，混匀后，将液体加入吸附柱中，8000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
  
• 向吸附柱中加入600μL漂洗液(使用前请先检查是否己加入无水乙醇)。12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
  
• 向吸附柱中加入600μL漂洗液，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
  
• 12000rpm离心2min，将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，否则漂洗液中的乙醇会影响后续实验如酶切、PCR等。
  
• 将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加50～200μL经65℃水浴预热的洗脱液，室温放置5min，12000rpm离心1min。
  
• 离心所得脱液再加入吸附柱中，12000rpm离心2min，即可得到高质量的基因组DNA。

得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1.0相当于大约50μg/mL双链DNA、40μg/mL单链DNA。OD260/0D280比值应为1.7～1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。