PAGE凝胶DNA回收试剂盒

产品货号：

QN0887

中文名称：

PAGE凝胶DNA回收试剂盒

英文名称：

Poly-Gel DNA Extraction Kit

产品规格：

20T|50T

发货周期：

1～3天

产品价格：

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本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统，从聚丙烯酰胺凝胶上回收DNA片段，同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒回收的DNA可适用于后续各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。

产品组成

组分	20T	50T
溶液A	5mL	15mL
溶液B	20mL	50mL
漂洗液	15mL	15mL
洗脱液	1.5mL	1.5mL
研磨杵	20个	50个
过滤柱	20个	50个
吸附柱	20个	50个

保存：室温干燥，有效期一年。

注意事项

电泳时最好使用新的电泳缓冲液，以免影响电泳和回收效果。
切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对DNA造成损伤。
本试剂盒对<50bp DNA片段回收效率偏低（30%左右），如要回收，应加大结合液的体积，延长吸附和洗脱的时间。
回收率与初始DNA量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越小，回收率越低。

第一次使用前请先在15mL漂洗液中加入60mL无水乙醇，所有离心步骤均可使用台式离心机在室温下离心。

将单一的目的DNA条带从聚丙烯酰胺凝胶中切下（尽量切除多余部分），放入1.5mL离心管中，称取重量，用研磨杵将胶尽量挤压碎。加入2倍体积的溶液A吹打混匀（每100mg胶加入200μL溶液A），75℃水浴30分钟。
用1mL的去尖吸头吸取混合物至过滤柱中（将胶一起吸入，溶液过多时可分次加入），13000rpm离心1分钟。将收集管中的滤出液转入新离心管中。
取6倍体积溶液B加入原离心管中（每100mg胶加入600μL），清洗管壁后加入过滤柱中(溶液过多时可分次加入)，颠倒过滤柱或轻轻吹打几次混匀，13000rpm离心1分钟。将所有收集的滤出液混合。
将总滤出液混匀后加入吸附柱中（溶液过多时可分次加入），13000rpm离心30～60秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放入收集管中。
向吸附柱中加入600μL漂洗液（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），13000rpm离心30～60秒，倒掉废液，将吸附柱重新放入收集管中。
向吸附柱中加入600μL漂洗液，13000rpm离心30～60秒，倒掉废液。
将离心吸附柱放回收集管中，13000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液。将吸附柱开盖置于室温1～2分钟，彻底晾干，以防止残留的漂洗液影响下一步的实验。
将吸附柱放到一个干净离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加适量65～70℃预热的洗脱缓冲液20～30μL，室温放置2分钟。13000rpm离心2分钟收集DNA溶液。
注意：
①为了增加回收效率，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，13000rpm再次离心1分钟。
②洗脱缓冲液体积不应少于20μL，体积过小影响回收效率。
③洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0～8.5之间。
DNA回收产物直接后续实验或者-20℃保存。

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