产品货号:
KL2401195
中文名称:
细菌DNA纯化试剂盒(磁珠法)
英文名称:
Bacterial DNA Purification Kit(Magnetic Beads)
产品规格:
100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:
产品特点:
产品组成:
保存:按标签指示条件保存,有效期一年。
使用方法:
一、制备重悬菌液
二、自动化提取体系
相关搜索:细菌DNA纯化试剂盒(磁珠法),Bacterial DNA Purification Kit(Magnetic Beads)
本试剂盒基于磁珠法可以用于绝大多数革氏阳性和阴性细菌基因组DNA的快速提取,提取得到的DNA可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。
产品特点:
- 产率一般在5~20μg/mL过液培养的饱和菌液(108~109个细胞)。
- OD260/280一般在1.8以上。
- DNA片段长度一般在40~50kb左右。
- 价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格便宜。
- 安全无毒,本试剂盒对人体无害,无腐蚀性和刺激性气味。
- 与市场上大多数基于磁珠法的自动核酸纯化仪兼容。
- 每次提取可以处理0.1~1.5mL的细菌,也可以使用菌落,本制品可以进行100次细菌DNA提取。
- 本制品只能用于科研。
产品组成:
| 组分 | 规格 | 保存 |
| 溶菌酶干粉 | 600mg | -20℃ |
| DNA专用磁珠 | 4mL | 4℃ |
| 细菌DNA纯化溶液A | 56mL | 室温 |
| 细菌DNA纯化溶液B | 28mL | |
| 细菌DNA纯化溶液C | 120mL | |
| 磁珠结合液 | 24mL | |
| 磁珠洗涤液1 | 70mL | |
| 磁珠洗涤液2 | 2×70mL | |
| DNA洗脱液 | 10mL |
保存:按标签指示条件保存,有效期一年。
使用方法:
一、制备重悬菌液
- 将0.1~1.5mL过夜培养的新鲜细菌12000×g室温离心1分钟后弃上清,如果是革氏阴性细菌,则加入0.2mL无菌水充分吹打均匀,得重悬菌液。如果是革氏阳性1.细菌,则重悬于0.2mL溶菌液中(溶菌液配制:40mL无菌水+600mg溶菌酶,配制后最好分装成小管并放-20℃长期保存,每次只用一小管),颠倒混匀5~10次后放37℃保温至少30分钟(有的革氏阳性菌种可能需更长时间,需要自己根据不同的细菌摸索),得重悬菌液。
二、自动化提取体系
- 试剂分装:按下表将各种试剂装在96孔板对应的孔中。
孔位 试剂名称和体积 第3/9列孔 700μL通用磁珠洗涤液1 第4/10列孔 700μL通用磁珠洗涤液2 第5/11列孔 700μL通用磁珠洗涤液2 第6/12列孔 55μL DNA洗脱液 - 样品孔的准备:按下表把重悬菌液、DNA纯化溶液A、DNA纯化溶液B、DNA纯化溶液C、磁珠结合液、DNA专用磁珠分装在96孔板的低1/7列孔和第2/8列孔中。
孔位 试剂名称和体积 第1/7列孔 - 重悬菌液:100μL
- DNA纯化溶液A:280μL
- DNA纯化溶液B:140μL
- DNA纯化溶液C:600μL
- 磁珠结合液:120μL
- DNA专用磁珠:20μL
第2/8列孔 - 重悬菌液:100μL
- DNA纯化溶液A:280μL
- DNA纯化溶液B:140μL
- DNA纯化溶液C:600μL
- 磁珠结合液:120μL
- DNA专用磁珠:20μL
细菌DNA纯化溶液A和细菌DNA纯化溶液B容易产生沉淀,细菌DNA纯化溶液B十分粘稠,均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分摇匀。 - 重悬菌液:100μL
- 打开核酸提取仪。
- 按下表设置程序。
孔位 名称 等待时间
(min)混合时间
(min)吸磁次数 容积
(μL)混合速度 温度 1 结合1 0 10 1 1260 中 65℃ 2 结合2 0 10 1 1260 中 65℃ 3 洗涤1 0 1 1 700 中 关闭 4 洗涤2 0 1 1 700 中 关闭 5 洗涤2 0 1 1 700 中 关闭 6 洗脱 4 5 1 55 中 关闭 4 去磁 0 1 0 700 快 关闭 - 将装好试剂及样本的96孔板放到核酸提取仪中,把磁力套插到仪器中,运行程序。
- 提取结束后,在核酸提取板的第6列孔把DNA转移至1.5mL离心管中,DNA样品可以直接用于PCR,也可放-20℃长期保存。
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