产品货号:
KL221202
中文名称:
指甲DNA提取试剂盒
英文名称:
Forensic Nail DNA Extraction Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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指甲的主要成分是角化蛋白,可以抵抗自然界中大多数的酶和化学物质,不易分解,正是因为指甲物证的不易破坏性、形态稳定性,指甲物证对于案件侦破具有关键作用。目前市场上专门用于法医指甲样品DNA提取的产品很少,为此本公司开发了本试剂盒。
- 充分的酶法降解和快速的柱式提取相结合,前者使DNA充分释放,后者使杂质充分被去除。
- DNA回收率一般在0.5μg/100mg左右(理论产率一般是0.1~1.5μg之间)。
- DNA纯度高,OD比值一般在1.6~1.8之间。
- 提取的DNA能够用于电泳、酶切、杂交检测和PCR。
组分 | 规格 |
指甲DNA提取溶液A | 50mL |
指甲DNA提取溶液B | 15mL |
指甲DNA提取溶液C | 50mL |
蛋白酶K溶液(10mg/mL) | 1mL |
通用洗柱液 | 50mL |
DNA洗脱液 | 10mL |
离心吸附柱 | 50套 |
保存:室温,有效期1年。其中蛋白酶K溶液置于-20℃,溶液B需置于4℃。
1.5mL塑料离心管、β-巯基乙醇、氯仿。
- 将30~50mg左右指甲剪碎,放入提前预冷至-70~-60℃的冷冻研磨仪中研磨成粉末,随后将样本转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。
- 加入1mL指甲DNA提取溶液A和20μL蛋白酶K溶液(10mg/mL),37℃保温10小时(一般过夜保温就可以)。
- 使用之前需取本次实验所需的溶液A现加入自备的β-巯基乙醇,β-巯基乙醇的终浓度为5%。
- 最好让反应体系处于摇晃状态,此保温长度一般可以让指甲溶化。
- 使用之前需取本次实验所需的溶液A现加入自备的β-巯基乙醇,β-巯基乙醇的终浓度为5%。
- 加入0.3mL的指甲DNA提取溶液B和0.2mL的自备氯仿,振荡器上振荡30秒充分混匀。
- 12000rpm室温离心3分钟,小心将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中。
- 在上清液中加入等体积的指甲DNA提取溶液C,上下颠倒30秒充分混匀。
- 将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将0.7~0.8mL混合液转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000rpm室温1分钟,弃穿透液。再把剩余的一半上柱,重复此操作。
- 将0.7mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
- 将0.3mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,12000rpm离心半分钟。
- 此步为第二次洗涤,一般可以省略。
- 空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。
- 将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中,加入30μL DNA洗脱液。
- 12000rpm离心1分钟,管底即为指甲DNA溶液,可立即用于PCR,也可长期保存在-20℃。
- 由于指甲中DNA的含量十分少,所以电泳检测时即使全部上样也只能看见十分微弱的DNA条带。
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