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cccDNA（covalently closed circular DNA）就是共价闭合环状DNA，它是几乎所有质粒DNA和某些病毒DNA（如HBV cccDNA）的存在形式，也常见于一些高等生物的疾病细胞中。其在人和其他真核细胞中的cccDNA又叫eccDNA（Extrachromosomal circular DNA，染色体外环状DNA)，它们通常是从正常基因组中分离或脱落下来，游离于染色体基因组之外的环状DNA分子。对酵母、线虫、纤毛虫和哺乳动物的eccDNA进行全基因组序列分析后发现，eccDNA的大小从几十个碱基到几十万个碱基对不等，不仅携带完整或部分基因，而且还携带基因间序列，且部分包含复制起始点，能独立完成复制。eccDNA包括small polydispersed circular DNA (spcDNA)和telomeric circles (t-circles)。因此分离纯化这些DNA对后续研究具有重要的意义。

• 能有效分离cccDNA和非cccDNA。
  
• 本制品基于沉淀法，回收cccDNA效率高。
  
• 跟后续的酶切电泳，核酸扩增等研究兼容。

• 在0.2mL含有cccDNA的液体样品中加入0.6mL cccDNA纯化溶液A，充分吹打或振荡2分钟。
  
• 加入0.2mL cccDNA纯化溶液B，振荡1分钟。
  
• 室温14000rpm离心3分钟，小心将上清液（约0.6mL）转移到新的塑料离心管中。
  
• 在离心管中加入等体积（0.6mL） cccDNA纯化溶液C，充分颠倒混匀。
  
• 室温14000rpm离心15分钟，小心弃上清，不要吸走管底微量的沉淀。
  
• 加入1mL自备的75%乙醇后，立即室温14000rpm离心1分钟，小心弃上清，不要吸走管底微量的沉淀。
  
• 将离心管再次14000rpm离心半分钟，小心吸走残留的液体（约50～100μL）。
  
• 加入10～100μL超纯水或TE缓冲液，轻柔吹打溶解后可以立即用于后续实验。长期放置需要放-20℃。