产品货号:
KL220322
中文名称:
细胞核DNA提取试剂盒
英文名称:
Nucleus DNA Purification Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是专门用于从纯化好的细胞核中提取其基因组DNA的试剂盒,提取得到的基因组DNA可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应。
- 快捷,整个过程室温操作约10分钟。
- DNA纯净,大多数DNA样品的OD260/280值在1.8~1.9之间。
- DNA产率一般在200μg/g左右。
- 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
组分 | 规格 |
细胞核DNA纯化溶液A | 20mL |
细胞核DNA纯化溶液B | 10mL |
细胞核DNA纯化溶液C | 45mL |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50mL |
DNA洗脱液 | 10mL |
保存:室温,有效期1年。
细胞核DNA纯化溶液A容易产生沉淀,细胞核DNA纯化溶液B十分粘稠,用前均需要在65℃水浴中加热使沉淀溶解或粘稠度降低,用前充分摇匀。
- 用自备的试剂分离细胞核,去除细胞浆。
- 在每1~5×106个细胞核沉淀中加入0.4mL预热的细胞核DNA纯化溶液A,用枪充分吹打以确保细胞核全部裂解。
- 加入0.2mL预热的细胞核DNA纯化溶液B到裂解液中,盖上盖子后颠倒2分钟充分混匀。由于细胞核DNA纯化溶液B十分粘稠,可将1mL枪头剪掉一截再用。
- 65℃水浴5~10分钟。如果室温放置,DNA产量将降低10~20%。
- 加入0.2mL自备氯仿,振荡器上充分振荡混均30秒,此时溶液将呈乳白色。
- 一定要确保离心管底的液体被震荡起来。
- 如果没有氯仿,此步可以跳过,直接进入第8步,但DNA产率和纯度会有所降低。
- 一定要确保离心管底的液体被震荡起来。
- 12000~15000g室温离心2分钟。上清透明,中间层为白膜(蛋白层)。如果没有氯仿,此步跳过。
- 小心将上清液平均转移到1个新的离心管中,避免触及中间的白膜。
- 在管中加入0.9mL的细胞核DNA纯化溶液C,颠倒半分钟混匀。
- 分两次上柱,即先转移一半的混合液到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液,然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
- 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
- 加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
- 12000~15000g室温再离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
- 室温放置半分钟使残留乙醇挥发。
- 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中,加入100μL DNA洗脱液,室温放置离心吸附柱1~2分钟。
- 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为DNA样品,可以立即使用或存放于冰箱待用。
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