产品货号：
KD3139
中文名称：
琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
英文名称：
Agarose gel DNA Recovery Kit
产品规格：
100T
发货周期：
1～3天
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产品内容：
产品说明：
本试剂盒适用于从琼脂糖凝胶电泳中回收100bp～50kb大小DNA片段。其原理是利用溶胶液融化凝胶，然后使用特殊材质制成的吸附柱高效特异的吸附DNA片段，再用TE Buffer或灭菌去离子水洗脱DNA片段。一般可在30分钟内完成操作。本试剂盒的吸附柱的最大吸附量可达40μg，DNA回收效率高达85%以上；电泳凝胶不必使用低熔点的琼脂糖；回收的DNA片段纯度较高，可直接用后续的各种酶促反应、DNA连接、DNA测序等。
操作步骤：
1.将琼脂糖凝胶电泳后的单一目的片段切出，放入1.5mL灭菌离心管中，加入约3倍凝胶量的溶胶液(体积比，0.1g凝胶视为100μL)，65℃加热5～10分钟使胶块完全融化。
2.所得液体(降至室温)加入吸附柱中，室温静置2分钟(特别重要)，12,000转/分离心30秒，弃去离心管中液体。
3.向吸附柱中加入500～600μL洗涤液，12,000转/分离心30秒，弃去离心管中液体。重复此步骤一次。
4.再于12,000转/分离心3～5分钟，或置于50℃烘箱彻底烘干。将吸附柱转移至1.5mL离心管中。
5.加入预热65℃～100℃ TE Buffer或灭菌去离子水(pH值7.5～8.0)30～50μL静置2分钟，12,000转/分离心2分钟，离心管内的液体即含有目的DNA片段。
使用中注意事项：
1.切胶时尽量减小胶块的体积，胶块过大会影响DNA片段回收的效率；切碎胶块有利于凝胶的融化。
2.胶块完全溶解所需时间因凝胶的浓度、大小不同而不等，凝胶浓度大于2%，适当增加溶胶液的量。
3.步骤4务必保证彻底清除吸附柱中的残液。
4.步骤5根据回收产物的量，建议适当多加TE Buffer或灭菌去离子水；保证去离子水pH值7.5～8.0。
5.为提高回收量，可将步骤5离心所得的溶液重新加入吸附柱中，静置2分钟，再次离心2分钟。
6.DNA产物应保存在-20℃，以防降解。
DNA浓度及纯度检测：
可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度和纯度。DNA在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于50μg/ml双链DNA，40μg/ml单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7～1.9，如用去离子水洗脱，比值会偏低，但不表示纯度低。
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