产品货号:
KD2170
中文名称:
土壤基因组DNA快速提取试剂盒
英文名称:
Soil gDNA Extract Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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产品内容:
(一)土壤样品处理:
1.65℃预热裂解液I,待其沉淀溶化后充分混匀,取0.5mL加入到1.5mL离心管中并置于65℃。
2.称取0.1~0.3g的土壤,加入到装有预热的裂解液I的离心管中,震荡器上剧烈震荡5~10min。
注意:如样品处理量较大,可按比例增大样品处理体积,但需保证震荡充分。
3.将离心管置于65℃水浴中保温10min。
(二)土壤DNA纯化:
1.12000rpm室温离心3min,将上清转移到一新离心管中(上清液一般呈淡黄色或深棕色,实际颜色取决于腐殖酸的含量,上清液的体积一般为300~400μL)。
2.在上清液中加入等体积的裂解液II,上下颠倒30秒充分混匀,溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
3.将离心管冰浴至少5min。
4.12000rpm室温离心3min,转移上清到新的1.5mL离心管中,上清液颜色将比上步得到的上清的颜色稍淡,体积在0.7mL左右。
5.加入0.2mL的氯仿(自备),震荡器上充分振荡30 s混匀。注意:一定要让管底的溶液震荡起来。
6.12000rpm室温离心3min,小心转移0.6mL上清到新离心管中。
(三)基因组DNA收集:
1.在步骤(二)所得的上清中加入1.5倍体积的结合液III(0.9mL),颠倒数次混匀后,分两次上DNA吸附柱,每次上柱后均先室温放置2min,然后12000rpm离心1min,倒掉穿透液。
2.在吸附柱中加入500μL洗涤液,12000rpm离心1min,弃穿透液。重复洗涤一次。
3.再将吸附柱12000rpm离心30 s以甩干乙醇。
4.将吸附柱放入一个干净的1.5mL离心管中。在吸附柱中央加入50μL洗脱液(65~70℃预热),室温静置2min。12000rpm离心2min。将穿透液重新加入吸附柱中央,12000rpm离心1min以洗脱更多基因组DNA。
5.检测DNA质量。将所得的基因组DNA保存于-20℃冰箱。
相关搜索:土壤基因组DNA快速提取试剂盒,Soil gDNA Extract Kit