产品货号:
JN0131
中文名称:
DNA回收试剂盒
英文名称:
DNA Gel/PCR Purification Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒采用特殊处理的硅胶膜和高效的溶胶体系,可简单、快速地从TAE或TBE琼脂糖凝胶中回收长度为50bp~15kb的高质量DNA片段。特殊处理的硅胶膜可以选择性地特异吸附高达8μg的DNA片段,但不吸附酶、矿物油和其它杂质,最后DNA片段可用Elution Buffer从Gel Recovery Column柱洗脱下来。回收率高达50~80%,回收的DNA片段可用于各种常规实验,例如酶切、连接、转化、PCR模板、测序和文库构建等。
组分 | 规格 |
Buffer CBS | 15mL |
Binding Solution | 25mL |
WA Solution | 30mL |
Wash Solution | 12mL |
Elution Buffer | 10mL |
ddH2O | 10mL |
Gel Recovery Column | 50个 |
2mL收集管 | 50个 |
1.5mL收集管 | 50个 |
保存:室温,有效期1年。
- 回收长片段DNA或短片段时应适当增加待回收DNA样品量
- 对于50bp~100bp之间的片段,可添加异丙醇增加小片段的回收率。
- 该试剂盒在室温条件下,可保存12个月,更长时间保存可置于4℃。若溶液产生沉淀,可在室温下放置一段时间,或在37℃水浴中预热10min,以溶解沉淀。
- Wash Solution在使用前应按要求加入48mL无水乙醇,并做好标记,使用后及时盖紧瓶盖,防止乙醇挥发。
- 电泳时请尽量使用新鲜配制的TAE或TBE缓冲液,以免影响电泳及回收效果。
- 溶胶在50~60℃温度范围,每2~3min轻微颠倒混匀。
- DNA吸附柱平衡处理:向Gel Recovery Column中加入200μL buffer CBS,12000rpm离心1min,倒掉收集管中的废液,将Gel Recovery Column重新放回到收集管中。再向Gel Recovery Column中加入200μL的ddH2O,12000rpm离心1min,倒掉收集管中的废液。将Gel Recovery Column重新放回到收集管中。
- 请使用当天处理过的Gel Recovery Column。
- 从琼脂糖凝胶中切下含有目的片段的凝胶,估计重量或精确称量重量。每100mg 1%琼脂糖凝胶加入100μL Binding Solution,如更高的琼脂糖凝胶,Binding Solution呈比例增加。
- 于50~60℃水浴5~10min,期间每2~3min间断轻微颠倒混匀,直至胶块完全融化。
- 对于400bp及以下片段,在溶胶后加入整个溶液0.5体积的异丙醇,可显著提高回收率。
- 将上述混合液转移至套有2mL收集管的吸附柱中,室温放置2min,12000rpm离心1min,取出吸附柱,并倒掉收集管中废液。
- 将吸附柱重新放回收集管中,加入500μL WA Solution,于12000rpm离心1min,倒掉收集管中废液。
- 将吸附柱重新放回收集管中,加入500μL Wash Solution,于12000rpm离心1min,倒掉收集管中废液。
- 重复步骤6一次。
- 将吸附柱重新放回收集管中,12000rpm离心1min,打开吸附柱盖子,室温放置5~10min或50℃放置3~5min,以彻底去除Wash Solution。
- 将吸附柱放入干净的1.5mL收集管中(试剂盒自带),对于膜中央悬空加入30~50μL Elution Buffer,盖好盖子,37℃放置2min,12000rpm离心1min,离心管中的液体即为包含目的基因的溶液。
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