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本制品是在我司磁珠法PCR产物纯化试剂盒的基础上进行改进、一次可同时处理96个不同样品的试剂盒。该试剂盒利用磁性纳米分离技术从PCR反应产物及其他酶促反应物中，提取纯化高质量DNA，操作简单、快速，并能有效的除去蛋白质，dNTP，引物等杂质，适用于自动化核酸纯化平台，纯化后的DNA可以应用到各类下游分子生物学实验。

• 适用范围广，回收效率高，对于80bp～50kb之间的DNA片段回收效率在95%以上。
  
• 样品体积范围广，不需要离心。
  
• 操作简单快速，20～30min完成核酸纯化。
  
• 实现核酸纯化高通量化和自动化。
  
• 一次可同时处理96个不同样品。

• 向Deep Well Collection Plate中反应液或酶促反应液加入2倍体积的Buffer B2和100μL QuMag Beads，吸打混匀，室温结合3min。
  
  • 向Deep Well Collection Plate中反应液或酶促反应液加QuMag Beads之前，请将其充分混匀。
    
  • 请务必将QuMag Beads加至液面以下，尽量将枪头上残留QuMag Beads吸打干净。
• 将Deep Well Collection Plate置于磁分离板上30 s，待QuMag Beads完全吸至孔壁上之后，吸弃上清，从磁分离板上取出Deep Well Collection Plate。
  
  • 吸弃上清前，若孔口粘有少量QuMag Beads，请用上清液将其洗至孔内，以确保所有QuMag Beads吸附至孔壁上。
    
  • 吸弃上清时，请勿吸入QuMag Beads，尽量吸净上清。
    
  • 从磁分离板上取出Deep Well Collection Plate后，若有少量上清，请将Deep Well Collection Plate再次置于磁分离板上，再次吸取上清。
• 加入700μL 70%乙醇，吸打混匀，将Deep Well Collection Plate置于磁分离板上30s，待QuMag Beads完全吸至孔壁上之后，吸弃上清，然后从磁分离板上取出Deep Well Collection Plate。
  
  • 吸弃上清前，若孔口粘有少量QuMag Beads，请用上清液将其洗至Deep Well Collection Plate内，以确保所有QuMag Beads吸至孔壁上。
    
  • 吸弃上清时，请勿吸入QuMag Beads，尽量吸净上清。
• 重复步骤3一次，室温干燥15～20min或者55℃恒温箱中干燥5～7min至Deep Well Collection Plate内无液体残留。
  
  • 干燥前，请尽量吸净Deep Well Collection Plate的液体。
    
  • 干燥前，若出现液体挂壁现象，可将Deep Well Collection Plate短暂离心后，再将其置于磁分离板上，待所有QuMag Beads完全吸至孔壁后再吸净Deep Well Collection Plate内的液体。
• 加入与PCR反应液或者酶促反应液等体积的TE Buffer (pH8.0)，充分悬浮QuMag Beads 5min，间或混匀。
  
  • 请将96Well PCR Plate壁上所有QuMag Beads悬浮在TE Buffer中。
    
  • 若浓缩PCR反应液，按照实验要求可以减少洗脱液的体积。
    
  • 根据实验需要可以将TE Buffer用无菌的双蒸水（pH>7.5）代替。
• 取出Deep Well Collection Plate并置于磁分离板上30s，待QuMag Beads完全吸至孔壁上后，小心吸取上清至96 Well Storage Plate，即获得纯化的产物。
  
  • 吸取上清前，请确保QuMag Beads完全吸至孔壁，请勿吸入QuMag Beads，否则影响产物纯度。

• PCR产物回收效率较低或者未回收到目的片段
  
  • PCR产物浓度太低。纯化前请通过琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物的浓度。
    
  • 结合不充分。加入Buffer MP和QuMag Beads之后，请将其充分混匀，并使QuMag Beads处于完全悬浮状态。
    
  • 操作过程中丢失QuMag Beads。结合及洗涤过程中可能有少量的QuMag Beads粘在96Well PCR Plate的孔口上，吸弃上清前请用少量的上清液清洗管口，使粘在管口的QuMag Beads也吸附在孔壁上。
    
  • 洗脱液不合适。洗脱缓冲液的pH值对洗脱效率有影响，如果使用水进行洗脱，请确保其pH>7.5，pH值过低可能导致低洗脱效率。
    
  • 洗脱过程操作不当。洗脱时请将孔壁上所有QuMag Beads悬浮在TE Buffer中。
    
  • 洗脱过程忘记水浴。加入TE Buffer之后请65℃水浴5～10min，常温条件下QuMag Beads只能释放少量的DNA，65℃条件下QuMag Beads与DNA的作用力减弱，QuMag Beads释放出大量的DNA。
• 回收的PCR产物进行后续酶切或者连接效率低
  
  • 乙醇有残留。请吸弃上清之后从磁分离板上取出Deep Well Collection Plate，放置1min之后再将Deep Well Collection Plate置于磁分离板上30 s，吸净孔底的液体。若出现残液挂壁现象，请短暂离心之后将Deep Well Collection Plate置于磁分离板上30 s，吸净孔内的液体。
    
  • QuMag Beads洗涤不充分。向孔内中加入85%乙醇以后，请充分混匀，使QuMag Beads充分悬浮在85%乙醇中。
    
  • QuMag Beads没有完全干燥。请将QuMag Beads完全干燥，保证无乙醇残留。
    
  • 最后一步吸取上清时吸入QuMag Beads。请确保所有QuMag Beads吸至孔壁上，再吸取上清。如果不小心吸入QuMag Beads，请将上清液放回原孔，待QuMag Beads完全吸至孔壁之后重新吸取上清。
    
  • 回收后的PCR产物在反复冻溶的情况下，会加速末端A和整个PCR产物的断裂，从而造成与T载体连接或直接酶切效率的下降。建议回收后立即进行酶切或连接实验。
    
  • 选择合适的PCR产物和T载体的分子数比例，有助于提高连接效率。
    
  • 请确保PCR最后72℃ 5～10min的延伸时间，这样才有足够的PCR产物在末段带有A附加碱基，保证较高的连接效率。