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本试剂盒通过Buffer SCL裂解样品，释放出基因组DNA，然后通过Buffer SP和氯仿去除蛋白等杂质。Buffer SB可以去除土壤中的腐殖酸，避免了腐殖酸对后续实验的干扰。使用本试剂盒从200mg土壤中可以获得5～10μg DNA，OD260/OD280比值一般为1.7~1.9。抽提获得的DNA可直接用于酶切、PCR、文库构建、Southern blot等相关实验。

• 自备材料：水浴锅、小型高速离心机（最大离心力≥12000×g）、1.5mL离心管、无水乙醇、RNase A (10mg/mL)、氯仿等。
  
• 试剂盒初次开启，按瓶身标签说明在Wash Solution中加入相应量的无水乙醇混匀，在瓶身做好标记，于室温密封保存（15mL Wash Solution中应加入45mL无水乙醇，30mL Wash Solution中应加入90mL无水乙醇）。
  
• 每次使用前请检查Buffer SCL是否出现沉淀，如有沉淀，请于65℃溶解后使用。
  
• 提前将水浴锅调至65℃备用。

• 称取100～300mg的土壤，加入400μL 65℃预热的Buffer SCL，震荡混匀，置于65℃水浴5min。
  
  • 震荡混匀时一定要将管底的土壤震荡起来。样品较多时可适当延长水浴时间。
    
  • 如需得到无RNA的DNA，可在水浴后加入20μL的RNase A（10mg/mL），室温放置2～5min。
• 12000rpm室温离心3min。吸取上清至一个干净的1.5mL的离心管中。
  
  • 上清液一般呈淡黄色或深棕色，具体取决于腐殖酸的含量。
    
  • 上清液的体积一般为300～350μL。
• 加入等体积Buffer SP，颠倒混匀，冰浴10min。
  
  • 加入Buffer SP混匀后溶液呈白色或淡黄色混浊状。
• 12000rpm室温离心3min。吸取上清至一个干净的1.5mL的离心管中。
  
• 加入200μL氯仿，充分混匀，12000rpm离心5min。吸取上层水相至一个干净的1.5mL的离心管中。
  
• 加入1.5倍体积的Buffer SB，充分混匀后用移液器将其全部加入到吸附柱中，室温静置2min。12000rpm离心30 s，倒掉收集管中废液。
  
• 将吸附柱放回收集管中，加入700μL Wash Solution，12000rpm离心30 s，倒掉收集管中废液。
  
  • Wash Solution使用前请检查溶液是否按比例加入无水乙醇。
• 将吸附柱放回收集管中，加入300μL Wash Solution，12000rpm离心1min，倒掉收集管中废液。
  
• 将吸附柱放回收集管中，12000rpm离心2min。
  
  • 此步绝不可省略，否则残余的乙醇会严重影响得率和后续实验。
• 取出吸附柱，放入一个新的1.5mL离心管中，在吸附膜中央加入50～100μL TE Buffer，静置3min，12000rpm离心2min，得到的DNA溶液置于-20℃保存或直接用于后续试验。
  
  • 如果想提高DNA的得率，可重复步骤10或将TE Buffer 60℃预热。