土壤基因组DNA快速提取试剂盒

产品货号：

GS0064

中文名称：

土壤基因组DNA快速提取试剂盒

英文名称：

Rapid Soil DNA Isolation Kit

产品规格：

50次|100次

发货周期：

1～3天

产品价格：

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本试剂盒通过Buffer SCL裂解释放出基因组DNA，然后Buffer SP和氯仿去除蛋白等杂质。但获得的土壤基因组DNA中可能含有腐殖酸，可与本公司的土壤腐殖酸清除剂(B641714)联合使用，以去除腐殖酸，避免对后续实验的干扰。使用本试剂盒从200mg土壤中可以获得5～15μg DNA，OD260/OD280比值一般为1.7~1.9。

组分	50次	100次
Buffer SCL	25mL	50mL
Buffer SP	25mL	50mL
TE Buffer (pH8.0)	5mL	10mL

保存：室温，4℃可保存更长时间。

注意事项

Buffer SCL中含有刺激性化合物，操作过程中应穿上实验服，戴好乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，防止吸入口鼻。沾染皮肤或眼睛后，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医生的帮助。

准备工作

自备材料：水浴锅、小型高速离心机（最大离心力≥ 12000×g）、1.5mL离心管、75%乙醇、无水乙醇、RNase A (10mg/mL)、氯仿等。
每次使用前请检查Buffer SCL是否出现沉淀，如有沉淀，请于65℃溶解后使用。
提前将水浴锅调至65℃备用。

称取100～300mg的土壤，加入400μL 65℃预热的Buffer SCL，震荡混匀，置于65℃水浴5min。
- 震荡混匀时一定要将管底的土壤震荡起来。样品较多时可适当延长水浴时间。
- 如需得到无RNA的DNA，可在水浴后加入20μL的RNase A（10mg/mL），室温放置2～5min。
12000rpm室温离心3min。吸取上清至一个干净的1.5mL的离心管中。
- 上清液一般呈淡黄色或深棕色，具体取决于腐殖酸的含量。
- 上清液的体积一般为300～350μL。
加入等体积Buffer SP，颠倒混匀，冰浴10min。
- 加入Buffer SP混匀后溶液呈白色或淡黄色混浊状。
12000rpm室温离心3min。吸取上清至一个干净的1.5mL的离心管中。
加入200μL氯仿，充分混匀，12000rpm离心5min。吸取上层水相至一个干净的1.5mL的离心管中。
加入2倍体积无水乙醇，颠倒5～8次使之充分混匀，室温放置2～3min。室温10000rpm离心5min，弃上清。
加入1mL 75%乙醇，颠倒漂洗1～3min，10000rpm离心2min，弃上清。
- 漂洗时一定要使沉淀悬浮起来。
重复步骤7一次。
开盖室温倒置5～10min至残留的乙醇完全挥发。
- 此步绝不可省略，否则残余的乙醇会严重影响得率和后续实验。
- 如果残留的乙醇有挂壁现象，倒掉液体后再短暂离心，将残液用移液器吸出。然后开盖室温放置5～10min至残留的乙醇完全挥发。
得到的DNA用50～100μL TE Buffer溶解。提取的DNA可立即进行下一步实验或-20℃保存。
- TE Buffer为10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH8.0。
- 获得的土壤基因组DNA中可能含有腐殖酸，可与本公司的土壤腐殖酸清除剂（B641714）联合使用，去除腐殖酸，避免对后续实验的干扰。

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