产品货号：
GS0062
中文名称：
真菌基因组DNA快速提取试剂盒
英文名称：
Rapid Fungi gDNA Isolation Kit
产品规格：
50次|100次
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒无需使用苯酚、氯仿等有毒试剂。从100mg新鲜大型真菌（如蘑菇）样品中可以获得10～20μg DNA，OD260/OD280比值一般为1.7~1.9。抽提获得的DNA可用于酶切、PCR、文库构建、Southern blot等相关实验。
| 组分 | 50次 | 100次 |
| Buffer Digestion | 24mL | 48mL |
| Buffer PF | 12mL | 24mL |
| TE Buffer (pH8.0) | 10mL | 20mL |
保存：室温，4℃可保存更长时间。
Buffer Digestion中含有刺激性化合物，操作过程中应穿上实验服，戴好乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，防止吸入口鼻。沾染皮肤或眼睛后，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医生的帮助。
- 自备材料：水浴锅、小型高速离心机（最大离心力≥ 12000×g）、1.5mL离心管、75%乙醇、异丙醇、β-巯基乙醇等。
- Buffer Digestion在低温下可能产生沉淀，使用前请检查，如有沉淀，请于65℃溶解后使用。
- 提前将水浴锅调至65℃备用。
- 取50～100mg新鲜大型真菌（如蘑菇）或20mg干燥的子实体或菌丝用液氮研磨成粉末，加入到1.5mL离心管中。加入400μL Buffer Digestion和4μL β-巯基乙醇，震荡混匀。65℃水浴1h至细胞完全裂解。
- 水浴过程中，每10min颠倒混匀一次，可促进样品裂解。
- 如需得到无RNA的DNA，可在水浴后加入20μL的RNase A（10mg/mL），室温放置2～5min。
- 水浴过程中，每10min颠倒混匀一次，可促进样品裂解。
- 加入200μL Buffer PF，充分颠倒混匀，-20℃冰箱放置5min。
- 室温10000rpm离心5min，将上清液（500～550μL）转移到新的1.5mL离心管中。
- 若上清液混浊，可再加入等体积氯仿混匀，12000rpm离心取上清。
- 加入等体积的异丙醇，颠倒5～8次使之充分混匀，室温放置2～3min。室温10000rpm离心5min，弃上清。
- 加入1mL 75%乙醇，颠倒漂洗1～3min，10000rpm离心2min，弃上清。
- 漂洗时一定要使沉淀悬浮起来。
- 重复步骤5一次。
- 开盖室温倒置5～10min至残留的乙醇完全挥发。
- 此步绝不可省略，否则残余的乙醇会严重影响得率和后续实验。
- 如果残留的乙醇有挂壁现象，倒掉液体后再短暂离心，将残液用移液器吸出。然后开盖室温放置5～10min至残留的乙醇完全挥发。
- 此步绝不可省略，否则残余的乙醇会严重影响得率和后续实验。
- 得到的DNA用50～100μL TE Buffer溶解。提取的DNA可立即进行下一步实验或-20℃保存。
- TE Buffer为10mM Tris-HCl，1mM EDTA,pH8.0
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