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本试剂盒无需使用苯酚、氯仿等有毒试剂。从2mL酵母菌液可以获得5～10μg DNA，OD260/OD280比值一般为1.7～1.9之间。抽提出的DNA可用于酶切、PCR、文库构建、Southern blot等相关实验。

• 自备材料：水浴锅、小型高速离心机（最大离心力≥ 12000×g）、1.5mL离心管、75%乙醇、异丙醇、β-巯基乙醇等。
  
• Buffer Digestion在低温下可能产生沉淀，使用前请检查，如有沉淀，请于65℃溶解沉淀后使用。
  
• Snailase比较难溶解，请提前将Snailase加入Snailase Storage Buffer，涡旋混匀使酶溶解，如溶解不完全，可以将
  
• Snailase置于冰箱4℃过夜溶解。待完全溶解后分装，-20℃冰箱保存备用。
  
• 提前将水浴锅调至65℃备用。

• 细胞和细胞核的裂解：取1～2mL过夜培养的酵母菌液，加入1.5mL离心管中，室温10000rpm离心1min，弃上清，收集菌体。
  
  • 1mL过夜培养的酵母培养物离心收集，湿重约为20mg。
• 酵母细胞壁的去除：按每20mg菌体湿重取600μL Snailase Reaction Buffer加入步骤1中的离心管，同时加入2.4μL β-巯基乙醇和50μL实验前准备好的Snailase，37℃水浴3h。室温10000rpm离心2min，弃上清。
  
  • 酵母细胞壁结构坚韧，若想破壁完全，可以增加Snailase的用量或延长破壁时间，可以37℃水浴过夜。
• 加入400μL Digestion Buffer，震荡混匀。65℃水浴1h至细胞完全裂解。
  
  • 水浴过程中，每10min颠倒混匀一次，可促进样品裂解。
    
  • 如需得到无RNA的DNA，可在水浴后加入20μL的RNase A（10mg/mL），室温放置2～5min。
• 加入200μL Buffer PY，充分颠倒混匀，-20℃冰箱放置5min。
  
• 室温10000rpm离心5min，将上清液（约500～550μL）转移到新的1.5mL离心管中。
  
  • 若上清液混浊，可再加入等体积氯仿混匀，12000rpm离心取上清。
• 加入等体积的异丙醇，颠倒5～8次使之混匀，室温放置2～3min。室温10000rpm离心5min，弃上清。
  
• 加入1mL 75%乙醇，颠倒漂洗1～3min，10000rpm离心2min，弃上清。
  
  • 漂洗时一定要使沉淀悬浮起来。
• 重复步骤7一次。
  
• 开盖室温倒置5～10min至残留的乙醇完全挥发。
  
  • 此步绝不可省略，否则残余的乙醇会严重影响后续实验。
    
  • 如果残留的乙醇有挂壁现象，倒掉液体后再短暂离心，将残液用移液器吸出。然后开盖室温放置5～10min至残留的乙醇完全挥发。
• 得到的DNA用50～100μL TE Buffer溶解。提取的DNA可立即进行下一步实验或-20℃保存。
  
  • TE Buffer为10mM Tris-HCl，1mM EDTA,pH8.0。