产品货号:
GS0057
中文名称:
血液基因组DNA抽提试剂
英文名称:
Bzup Blood gDNA Isolation Reagent
产品规格:
25mL|100mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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Bzup Blood通过高pH条件下的胍盐等离液剂和变性剂的作用将血液样品一步裂解,并水解RNA,再经过乙醇沉淀即可快速得到基因组DNA。
Bzup Blood主要用于从血液中提取基因组DNA,抽提出的DNA可用于酶切、PCR、文库构建、Southern blot等相关实验。操作快速简单,无需水浴,也不需要使用Proteinase K、氯仿等其它试剂,全过程可在30分钟内完成。适用范围广,可用于DNA小量提取,也可用于DNA大量提取。
组分 | 25mL | 100mL |
Bzup Blood Reagent | 25mL | 100mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:室温
Bzup Blood试剂中含有腐蚀性化合物,操作过程中应避免直接接触,如沾染皮肤或眼睛请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。
小型高速离心机(最大离心力≥ 12000×g)、1.5mL离心管、TE溶液(pH8.0)、0.9% NaCl溶液、75%乙醇、无水乙醇等。
- 细胞和细胞核的裂解:
- 含无核红细胞的血液样品(如人血液):取50~100μL抗凝全血加入1mL Bzup Blood,混匀,室温放置5~10min至完全裂解。
- 当样品体积>100μL时,8000rpm离心2分钟,弃上清。加入1倍体积0.9% NaCl溶液重悬,8000rpm离心2分钟,弃上清。再用1倍体积4℃预冷的TE [10mM Tris HCl,1mM EDTA,pH8.0]重悬,8000rpm离心2分钟,弃上清,加入1mL Bzup Blood。
- 含有核红细胞的血液(如家禽血液):取10μL抗凝全血加入1mL Bzup Blood,混匀,室温放置5~10min至完全裂解。
- 凝固血块:取0.1g凝固血块,用液氮充分研磨,加入1mL Bzup Blood,混匀,室温放置5~10min至完全裂解。
- 细胞核:将1mL Bzup Blood直接加入分离好的细胞核总汇,充分混匀。室温静置5~10min。
- 含无核红细胞的血液样品(如人血液):取50~100μL抗凝全血加入1mL Bzup Blood,混匀,室温放置5~10min至完全裂解。
- 离心:10000rpm室温离心10min,将上清(约900μL)转移到新的1.5mL离心管中。
- 此步去除不溶的组织碎片和水解的RNA等杂质。
- 沉淀:加入500μL无水乙醇,颠倒5~8次使其充分混匀,室温放置2~3min,如有大量DNA沉淀产生,用移液枪头将沉淀的DNA挑取到新的1.5mL离心管中。若无法挑取,10000rpm室温离心5min,小心弃掉上清。
- 漂洗:加入1mL 75%乙醇,颠倒漂洗1~3min,12000rpm离心2min,弃上清。再重复此步骤一次。
- 漂洗时一定要使沉淀悬浮起来。
- 晾干:开盖室温倒置5~10min至残留的乙醇完全挥发。
- 此步绝不可省略,否则残余的乙醇会严重影响后续实验。
- 如果残留的乙醇有挂壁现象,倒掉液体后再短暂离心,将残液用移液器吸出。然后开盖室温放置5~10分钟至残留的乙醇完全挥发。
- 请勿过度干燥,避免用真空干燥仪进行干燥,否则会导致溶解困难。
- 此步绝不可省略,否则残余的乙醇会严重影响后续实验。
- 溶解:得到的DNA用8mM NaOH溶解。加入8mM NaOH充分溶解后若有不溶物,12000rpm离心2min,取上清。
提取的DNA可立即进行下一步实验或-20℃保存。- 8mM NaOH易吸收空气中的CO2,配制时间应在一个月以内。
- 8mM NaOH也可以用TE Buffer或水代替。
- 该步骤已经去除了绝大部分RNA,如果需要进一步去除其中的RNA,请用RNase A对DNA溶液进行处理并通过再次乙醇沉淀回收DNA。
- 8mM NaOH易吸收空气中的CO2,配制时间应在一个月以内。
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