柱式PAGE胶DNA回收试剂盒

产品货号：

GS0032

中文名称：

柱式PAGE胶DNA回收试剂盒

英文名称：

SPIN-10 PAGE Gel DNA Column Recovery Kit

产品规格：

50次|100次

发货周期：

1～3天

产品价格：

询价

本试剂盒适用于从PAGE胶中回收50bp～500bp的DNA片段，回收效率可达80%。该试剂盒采用特殊的吸附膜，能够有选择性地吸附核酸分子，去除其他杂质，得到高质量的DNA回收产物。所得到的DNA可直接用于酶切、连接、测序等后续的分子生物学试验。

适用范围广，回收效率高，对于50bp～500bp之间的DNA片段，回收效率在80%以上。
操作简单快速。
无需酚抽提，无需乙醇沉淀

组分	50T	100T
Diffusion buffer	12mL	24mL
Binding Buffer II	50mL	100mL
Wash Solution	12mL	24mL
Elution Buffer	5mL	10mL
吸附柱及收集管	50套	100套

保存：2～8℃
注：Binding Buffer II中含有刺激性的化合物，操作过程中应穿上实验服，戴好乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，防止吸入口鼻。沾染皮肤或眼睛后，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医生的帮助。

准备工作

自备试剂：无水乙醇、异丙醇等。
按瓶身标签说明在Wash Solution中加入4倍体积的无水乙醇，混匀后在瓶身做好标记。密封于室温保存。
Diffusion Buffer在低温下可能产生沉淀，使用前请检查，如有沉淀，请于55℃溶解，待冷却至室温后使用。
Binding Buffer II在低温下可能产生沉淀，使用前请检查，如有沉淀，请于37℃溶解，待冷却至室温后使用。
提前将水浴锅调至55℃备用。

通过PAGE电泳尽可能将目的DNA片段与其它片段分开，用干净的手术刀片将含目的DNA片段的胶块切下，放入1.5mL离心管中，称重。
- 尽可能多地去掉不含目标DNA的PAGE胶。
- 每管胶块不要超过400mg，否则导致溶胶不完全。
根据胶块的重量和浓度，按每100mg PAGE胶（如胶块不足100mg则用水补充至100mg）加200μL的比例加入Diffusion buffer，然后用枪头将泡在溶液当中的胶块捣碎。
将离心管置于55℃水浴2h，间或混匀，以促进胶中DNA扩散到溶液中。
- 如果目的DNA的碱基的数量在500bp～1000bp之间，可适当延长温浴3～5小时。
将上述溶液10000rpm离心10min。
将上清转移到一个干净的1.5mL离心管中，依次加入5倍体积Binding buffer II和3倍体积的100%的异丙醇，充分混匀。
将上述溶液全部移入吸附柱，室温放置2min，8000rpm离心30sec。倒掉收集管中的液体，将吸附柱放入同一个收集管中。
- 如果溶胶液总体积大于750μL，则每次使用750μL，多次上柱。
- 向吸附柱中加入500μL Wash Solution，10000rpm离心1min。倒掉收集管中的液体，将吸附柱放入同一个收集管中。
- Wash Solution首次使用前请检查溶液是否已加入正确量的无水乙醇。
重复步骤7一次。
将空吸附柱和收集管放入离心机，12000rpm离心2min。
- 此步绝不可省略，否则残余的乙醇会严重影响得率和后续实验。
将吸附柱放入干净的1.5mL离心管中，在吸附膜中央加入30～50μL Elution Buffer，室温静置1～2min，12000rpm离心1min。将所得到的DNA溶液置于-20℃保存或用于后续试验。
- Elution Buffer为2.5mM Tris-HCl，pH8.5，可以用TE或水（pH> 7.0）代替。
- 将Elution Buffer预热至60℃可以进一步提高得率。
- 请勿使用小于30μL的洗脱液进行洗脱。

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