产品货号：
BTN60802
中文名称：
柱式细菌DNA提取试剂盒
英文名称：
Bacterial DNA Isolation Kit
产品规格：
50T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本试剂盒可以用于绝大多数革氏阳性和阴性细菌基因组DNA的快速提取。
保存：室温，有效期1年。收到后请将溶菌酶干粉置于4℃或-20℃保存。
氯仿、无菌水。
一、对革氏阴性细菌
二、对革氏阳性细菌
三、其他说明
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- 操作简单，整个过程不到20分钟。
- 产率一般在5～20μg/mL过液培养的饱和菌液（108～109个细胞）。
- OD260/280一般在1.8以上，可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。
- DNA片段长度一般在40～50kb左右。
- 每次提取可以处理0.1～1.5mL的细菌，也可以使用菌落。
- 安全无毒，本试剂盒对人体无害，无腐蚀性和刺激性气味。
| 组分 | 规格 |
| 溶菌酶干粉 | 600mg |
| 细菌DNA纯化溶液A | 15mL |
| 细菌DNA纯化溶液B | 7.5mL |
| 细菌DNA纯化溶液C | 30mL |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50mL |
| DNA洗脱液 | 10mL |
保存：室温，有效期1年。收到后请将溶菌酶干粉置于4℃或-20℃保存。
氯仿、无菌水。
- 细菌DNA纯化溶液A和细菌DNA纯化溶液B容易产生沉淀，细菌DNA纯化溶液B十分粘稠，均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。
- 本试剂盒仅用于科研实验，请勿用于医疗、食品、化妆品等其他非科研用途，请勿将本试剂盒置于普通住宅中。
- 为了您的健康，请在使用操作时佩戴一次性手套。
一、对革氏阴性细菌
- 将0.1～1.5mL过夜培养的菌液转移到1.5mL塑料离心管中，12000rpm室温离心1分钟沉淀细菌，弃上清。
- 加入300μL预热的溶细菌DNA纯化液A到细菌沉淀中，充分吹打均匀。
- 再加入150μL预热的细菌DNA纯化溶液B到离心管中，颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。由于溶液B比较粘稠，可以采取称量方法取用，150μL约等于150～160mg。也可以将1mL枪头剪去一截再吸取。
- 65℃放置3～5分钟。如果室温放置，DNA产量会降低10～20%。
- 加入200μL自备氯仿，震荡混匀10～30秒，此时溶液将呈乳白色。
- 12000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明，中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中，避免触及中间层的白膜。
- 加入1.5倍体积(约0.7mL)的细菌DNA纯化溶液C，颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中，室温放置至少2分钟。
- 12000rpm室温离心1分钟，DNA将吸附在离心吸附柱的膜上，倒弃收集管中的穿透液。
- 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中，12000rpm室温离心1分钟，弃穿透液。
- 重复上步操作一次。
- 空甩半分钟去除残留液体，将离心吸附柱转移到新的1.5mL离心管中。
- 加50～100μL DNA洗脱液，室温放置3～5分钟。
- 12000rpm室温离心1分钟即得DNA溶液。
- 由于本制品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强，可以重复上步操作一次以便得到更多的DNA。
- 直接取5～10μL电泳检测DNA，其余放冰箱备用。
二、对革氏阳性细菌
- 将0.1～1.5mL过夜培养的革氏阳性细菌12000rpm室温离心1分钟后，重悬于0.6mL溶菌液中，颠倒混匀5～10次后放37℃保温至少30分钟。
- 溶菌液配制:30mL无菌水+600mg溶菌酶，配制后最好分装成小管并放-20℃长期保存，每次只用一小管。
- 有的革氏阳性菌种可能需更长时间，需要自己根据不同的细菌摸索。
- 溶菌液配制:30mL无菌水+600mg溶菌酶，配制后最好分装成小管并放-20℃长期保存，每次只用一小管。
- 12000rpm室温离心10分钟，小心弃上清。
- 后续处理接上面的革氏阴性细菌提取步骤中的第2步。
三、其他说明
- 可以直接使用细菌菌落提取DNA，操作时直接将细菌菌落挑入到细菌DNA纯化溶液A中，后续操作同上。
- 从单个菌落中提取到的DNA较少，所以只用30μL DNA洗脱液洗脱。
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