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本试剂盒适用于快速提取植物组织（包括复杂多糖多酚类植物）基因组DNA。采用改进的经典CTAB植物DNA抽提液（添加多种针对植物特点的多糖、多酚去除成份）迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，氯仿抽提后通过离心清除多糖、多酚和蛋白质（根据需要，上清中还加入异丙醇离心沉淀基因组DNA，进一步去除其它各种杂质），然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤，进一步将多糖、多酚和细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。

• 裂解液PL、或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀，可以在55℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。结合液PQ盐酸胍浓度高，加入乙醇后可能出现一些沉淀不影响使用，直接取上清用。
  
• 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

• 离心吸附柱内硅基质膜全部采用特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
  
• 不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
  
• 快速，简捷，单个样品操作一般可在1小时内完成。
  
• 数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达20kb～50kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应。

• 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机。
  
• 开始实验前将需要的水浴先预热到65℃备用。
  
• 需要自备氯仿、无水乙醇和β-巯基乙醇。
  
• 结合液PQ和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
  
• 不同来源的植物组织材料中提取DNA的量会有差异，一般100mg新鲜组织典型产量可达3～25μg。
  
• 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在-20℃。DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
  
• 本试剂盒是按照标准提取过程配置各溶液体积，如果样品DNA含量低或者产量低，需要扩大提取量，还需要另外购买溶液。

• 第一次使用前请先在漂洗液WB和结合液PQ中加入指定量的无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
  
• 取所需适量裂解液PL放置在65℃预热，使用前加入β-巯基乙醇到终浓度2%。

• 取植物新鲜组织约100mg或干重组织约30mg，加入液氮充分碾磨成细粉。
  
• 将研磨好的粉末迅速转移到预先装有600μL 65℃预热裂解液PL的离心管中（实验前在预热的PL中加入巯基乙醇，使其终浓度为2%），迅速颠倒混匀后，将离心管放在65℃水浴20～30min，水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。
  
  • 可选步骤：如果预计样品RNA丰富易残留，可在水浴前加入5～6μL RNase(10mg/mL)。如果组织干燥或者产量低，可以适当延长水浴时间。
    
  • 如果提取的DNA残留RNA较多导致电泳时候条带拖尾，条带扭曲，背景很高等不正常电泳情况，可以加1% RNase(10mg/mL)37℃或者室温放置半小时即可消化RNA，消化完后不需要特殊处理便可用于PCR或者酶切。
• 加入700μL氯仿，充分混匀，13000rpm离心5min。
  
  • 可选步骤（一般不需要）：若提取富含多糖多酚或淀粉植物，可在第3步前，用Tris饱和酚（PH8.0）/氯仿（1∶1）等体积抽提一遍。
• 小心吸取上清（约600μL）到一个新的1.5mL离心管（注意不要吸到界面物质。）加入1.5倍体积结合液PQ （请先检查是否已加入无水乙醇!）后立刻涡旋，充分混匀。
  
• 将混匀的液体转入吸附柱AC中，13000rpm离心30sec，弃掉废液。
  
  • 吸附柱容积为700μL左右，可分次加入离心。
• 加入500μL抑制物去除液IR，13000rpm离心30sec，弃废液。
  
• 加入600μL漂洗液WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），13000rpm离心30sec，弃掉废液。
  
• 重复操作步骤7。
  
• 将吸附柱AC放回空收集管中，13000rpm离心2分钟。尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
  
• 取出吸附柱AC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加50～100μL洗脱缓冲液EB，室温放置3～5分钟，13000rpm离心1min。将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，室温放置2分钟，13000rpm离心1min。
  
  • 洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果预计和需要产量高，可增大洗脱体积，如果需要DNA浓度较高，可以适当减少洗脱体积，但是最小体积不应少于50μL，体积过小降低DNA洗脱效率，减少DNA产量。
    
  • 如追求最大产量，洗脱缓冲液事先在80～100℃水浴中预热后再加可以提高产量。

• 取适量植物组织（新鲜组织400mg或干重组织200mg）在研钵中加入液氮充分碾磨成细粉。
  
• 转移细粉到一个15mL离心管，不要解冻，加入9mL 65℃预热的裂解液PL (确认已经加入β-巯基乙醇至2%)，剧烈涡旋振荡混匀，用大口径枪头吹打帮助裂解。
  
  • 如果组织裂解困难，可根据需要加一个轻柔匀浆10秒的步骤帮助裂解。
• 室温放置60分钟，中间不时颠倒离心管以混合样品数次。
  
  • 如果组织干燥或者产量低，可以放置在65℃水浴。
• 加4.5mL氯仿，涡旋充分混匀，3000g离心10分钟。
  
• 小心吸取上清到一个新的15mL离心管，注意不要吸到界面物质。重复一遍步骤4。
  
• 小心吸取上清到一个新的15mL离心管，估算上清量，加入0.7倍体积的异丙醇，涡旋混匀来沉淀DNA。
  
• 立刻3000g离心20分钟沉淀DNA，弃上清，颠倒离心管口放在纸巾上控干残留液体，并小心用用移液枪吸干沉淀周围残留液体（不要过于干燥DNA沉淀）。
  
• 加入300μL～400μL预热到65℃的灭菌水，重新溶解DNA，可能需要在65℃短暂温育帮助溶解，期间不断轻弹管底帮助溶解。
  
• 加入1.5倍体积结合液PQ（450μL～600μL，请先检查是否已加入无水乙醇!）后立刻涡旋，充分混匀。
  
• 后续步骤和上面标准操作步骤5开始后完全一样。