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本试剂盒采用新型硅基质膜离心柱及特殊的缓冲液系统，可从聚丙烯酰胺凝胶中简捷高效回收20bp～500bp的短片段DNA片段，回收效率可高达85%。并可最大限度去除杂质，获得高纯度的DNA，所得到的DNA可直接用于酶切、连接、测序等后续的分子生物学试验。

• 适用范围广泛，可以回收20bp～2kb的单链或者双链DNA。
  
• 使用优质结合液，不含传统结合液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
  
• 独特的配方保证了该试剂盒比一般试剂盒回收效率大大提高。
  
• 快速、方便离心柱型，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。

• 第一次使用前请先在40mL Binding Buffer瓶中加入60mL异丙醇！
  
• 第一次使用前请先在13mL漂洗液WB中加入52mL无水乙醇，加入后请及时打钩标记，以免多次加入!
  
• 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机。
  
• 结合液中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。
  
• 电泳时最好使用新的电泳缓冲液，以免影响电泳和回收效果。
  
• 切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对DNA造成损伤。也可以选择可见光染料染色后在可见光下切胶会避免紫外对DNA损伤。
  
• 回收率与片段大小、凝胶浓度、初始DNA量和洗脱体积有关。

• 切取含DNA片段的PAGE凝胶(100mg左右，尽可能多地把多余的胶切除，否则会影响回收效率)，放入1.5mL离心管中，用移液枪头尽可能捣碎(最好先在酒精灯上将枪头的口烧密闭再用于捣碎)，捣得越细越好。
  
• 向凝胶中加入1～2倍体积的Diffusion Buffer(如100mg凝胶加入100～200μL Diffusion Buffer)，55℃温浴30分钟～2小时，期间每15分钟涡旋震荡混匀，促进胶中DNA扩散到溶液中。
  一般来说，回收片段越大，DNA扩散需要的时间越长，100bp左右的DNA片段温浴30分钟就可以(时间长些也不影响回收效果)；如果回收500bp～1000bp的DNA片段，可以将温浴时间延长3～5个小时。也可以37℃温浴12～16小时过夜。
  
• 12000rpm离心5分钟。小心取上清转入新的离心管。记录上清体积。
  
• 加入9倍上清体积的Binding Buffer，混匀。
  回收片段＞100bp时，加5倍上清体积的Binding Buffer即可。
  平衡液预处理吸附柱：
  使用平衡液预处理硅胶膜吸附柱为必做步骤，具体方法参见前文“关于平衡液的使用”。
  
• 将上一步所得溶液加入吸附柱EC中(吸附柱放入收集管中)，室温放置1分钟，12000rpm离心30～60秒，倒掉收集管中的废液。
  吸附柱最大容积为750μL，若溶液体积大于750μL，可分批加入。
  
• 加入600μL漂洗液WB(请先检查是否已加入无水乙醇!)，12000rpm离心30秒，弃掉废液。
  
• 重复步骤6一遍。
  
• 将吸附柱EC放回空收集管中，13000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
  
• 取出吸附柱EC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加30～50μL洗脱缓冲液EB，室温放置2钟，12000rpm离心1分钟。如果需要较高浓度核酸，可将得到的溶液重新加入吸附柱中，离心1分钟。
  洗脱体积越大，洗脱效率越高。如果需要核酸浓度较高，可以适当减少洗脱体积，但是最小体积不应少于25μL，体积过小降低核酸洗脱效率，减少产量。

• 介绍：核酸吸附硅胶膜柱子长期放置过程中会同空气中的电荷/尘埃发生反应而影响其核酸的结合能力。硅胶柱经平衡液预处理后可大大减少柱子中硅胶膜的憎水基团，提高核酸的结合能力。从而提高硅胶柱子回收效率或者产量。平衡液是强碱性溶液，若不小心碰到，请用大量自来水清洗。用完后需盖紧瓶盖，以免接触空气。室温保存。在保存过程中可能有沉淀生成，请加热至37℃使沉淀完全消失。
  
• 使用方法：取一个新的硅胶膜吸附柱子装在收集管中，吸取100μL的平衡缓冲液至柱子中。13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中废液，将吸附柱子重新放回收集管。此时平衡液预处理柱子完毕。接后续的操作步骤。