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JM109化学感受态细胞图片
产品货号:
SY0017
中文名称:
JM109化学感受态细胞
英文名称:
JM109 Chemically Competent Cell
产品规格:
100μl×10管
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本品是经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。经使用pUC19质粒检测,本品转化效率可达108 cfu/μg,广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。本品适用于蓝白斑筛选,另对recA1和endA1进行特定的改造使其更能保证克隆DNA的稳定性以及更有利于高纯度质粒DNA的提取。在基因重组实验中,常使用感受态细胞摄取外源DNA以制备基因文库、重组质粒以及进行亚克隆等。

JM109感受态细胞基因型:recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 e14-(mcrA-) supE44 relA1 △(lac-proAB)/F’ [traD36 proAB+ lac Iq lacZ △M15]。

组份:JM109感受态细胞 100μl×10,pUC19(0.1 ng/μl) 5μl

注意事项

1)感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
2)整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3)为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温,避免移液枪吹吸。
4)为防止转化不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,最低化实验可能遇到的风险。

使用方法
1)取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2)向100 μl感受态细胞悬液中加入2-10μl目的DNA或连接产物,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置20min。
3)将离心管置于42℃水浴中放置90s,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2min,该过程不要摇动离心管。
4)向离心管中加入500μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床振荡培养60min(200 rpm),目的是促使菌体复苏,抗性基因表达。
5)将离心管内容物混匀,根据实验要求(质粒,重组连接产物转化),吸取不同体积已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,37℃培养12-16 h。

储存条件:-80℃
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