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本公司生产的JM1110感受态细胞采用经特殊工艺处理得到，可用于DNA的化学转化。使用pUC18质粒检测，转化效率可达10⁸ cfu/μg，-70℃保存几个月转化效率不发生改变。

基因型：
rpsL (Str R) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB)/F′ [traD36 proAB lacIq lacZΔM15]

产品特点：

• JM 110是一种甲基化基因dam、dcm缺失的菌株，使DNA不被甲基化，使用其转化所得到的质粒DNA，可被对dam、dcm甲基化敏感的限制酶切割。
• 只适用于转化质粒DNA。
• 细胞具有硫酸链霉素(Strr)抗性。

操作方法：(以下操作均按无菌条件的标准进行)

• 取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中，置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。以下实验以100μl感受态细胞为例。
• 向感受态细胞悬液中加入目的DNA(50μl的感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30分钟。
• 将离心管置于42℃水浴中放置45秒，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却2-3分钟，该过程不要摇动离心管。
• 向每个离心管中加入500μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床振荡培养45分钟(150转/分钟)，目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
• 将离心管内容物混匀，吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上，用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收，倒置平板，37℃培养12—16小时。

注意：
涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多，可取更少量转化产物涂布平板；反之，如转化的DNA总量较少，可取200—300μl转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少，可通过离心(4000rpm,2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板)

注意事项：

• 感受态细胞应保存在-70℃，不可多次冻融和放置时间过长，以避免感受态细胞的转化效率。
• 进行转化操作时，应根据相应温度及无菌条件的要求进行。
• 为防止转化实验不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，将损失降到最低。

储存条件：-70℃，有效期6个月。
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