产品货号:
MQ0171
中文名称:
B834(DE3)感受态细胞
英文名称:
B834(DE3) Chemically Competent Cell
产品规格:
10×100μl|50×100μl
发货周期:
1~3天
产品价格:
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B834是BL21菌株的父系菌株。该系列宿主菌是蛋氨酸缺陷型,可以用来高水平,高特异性的使用35S-蛋氨酸和硒代蛋氨酸标记目的蛋白,进行蛋白质晶体结构研究。B834宿主菌也是lon和ompT蛋白酶缺陷型菌株。DE3是溶源性的λDE3,所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。
基因型:
F-ompT hsdSB(rB-mB-) galdcm met(DE3)
保存:-80℃
相关搜索:B834(DE3)感受态细胞,B834(DE3) Chemically Competent Cell
基因型:
F-ompT hsdSB(rB-mB-) galdcm met(DE3)
组分 | 规格 |
B834(DE3)感受态细胞 | 10×100μL |
保存:-80℃
- 取100μ1冰上融化的B834 (DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
- 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
- 向离心管中加入700μ1不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
- 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μ1左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
- 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
- 感受态细胞最好在冰上融化。
- 混入质粒时应轻柔操作。
- 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
- 诱导时,IPTG浓度可选(0.l-40mM均可)。
- 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间、温度及IPTG浓度需实验者优化。
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