产品货号:
MQ0042
中文名称:
BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞
英文名称:
BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL Chemically Competent Cell
产品规格:
10×100μl|50×100μl
发货周期:
1~3天
产品价格:
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BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株来源于BL21-Gold菌株,缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶,从而减少对重组蛋白的降解,补充大肠杆菌缺乏的4种稀有密码子(AGA、AUA、CCC、CUA)对应的tRNA(argU、ileY、proL、leuW),提高外源基因,尤其是富含AT-或GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。
该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶),可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达,同时具有四环素,氯霉素,链霉素,壮观霉素抗性。
BL21-Codon Plus(DE3)-RIPL感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
保存条件:-80℃
基因型:
F–ompT hsdS(rB–mB–)dcm+ Tetr galλ(DE3)endA Hte [argU proL Camr] [argU ileY leuW Strep/Specr]
操作说明:
1.取100μL冰上融化的BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μL不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μL左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞最好在冰上融化。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4.诱导时,IPTG浓度可选(0.1~2mM均可)。
5.为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
相关搜索:BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞
该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶),可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达,同时具有四环素,氯霉素,链霉素,壮观霉素抗性。
BL21-Codon Plus(DE3)-RIPL感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
保存条件:-80℃
基因型:
F–ompT hsdS(rB–mB–)dcm+ Tetr galλ(DE3)endA Hte [argU proL Camr] [argU ileY leuW Strep/Specr]
操作说明:
1.取100μL冰上融化的BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μL不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μL左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞最好在冰上融化。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4.诱导时,IPTG浓度可选(0.1~2mM均可)。
5.为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
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