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BL21化学感受态细胞图片
产品货号:
MQ0036
中文名称:
BL21化学感受态细胞
英文名称:
BL21 Chemically Competent Cell
产品规格:
10×100μl|50×100μl
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
BL21是最早开发的用于原核表达的菌株,BL21(DE3)、Rosetta、OrigamiB(DE3)等一系列原核表达菌株均来源于BL21菌株。
该菌株主要用于非毒性蛋白的表达,不含T7 RNA聚合酶,所以不能用于由T7启动子驱动的蛋白表达(如:pET系列);但含有大肠杆菌RNA聚合酶,可以用于tac或trc等使用大肠杆菌RNA聚合酶的原核系统的表达(如:pGEX,pMAL质粒)。
BL21感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率达107cfu/μg。
保存条件:-80℃
基因型:
E.coli B F-dcm ompT hsdS(rB-mB-)gal [malB+]K-12(λS)
操作说明:
1.取100μl冰上融化的BL21感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞最好在冰上融化。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4.诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
5.为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
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