产品货号：
KL26-110
中文名称：
B型大肠杆菌SHuffle T7 Express化学感受态细胞
英文名称：
B E.coli SHuffle T7 Express Chemically Competent Cells
产品规格：
10×100μL
发货周期：
1～3天
产品价格：
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大肠杆菌SHuffle T7 Express菌株是大肠杆菌B型菌株的衍生菌株，其经特殊工艺处理得到大肠杆菌SHuffle T7 Express化学感受态细胞。大肠杆菌SHuffle T7Express菌株具有抗T1噬菌体感染的特点，具有链霉素，壮观霉素抗性。
菌株基因型：fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT ahpC gal λatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR,lacIq) ΔtrxB sulA11 R (mcr73::miniTn10--TetS) 2 [dcm] R(zgb-210::Tn10--TetS) endA1 Δgor Δ(mcrC-mrr)114::IS10
- 使用pUC19质粒检测转化率＞1E7 cfu/μg DNA。
- 该菌株为Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶缺陷型，可减少对重组蛋白的降解。
- 该菌株的染色体中整合了一个拷贝的二硫键异构酶DsbC基因，可以促进含有二硫键蛋白的正确折叠。
- 该菌株染色体中整合了一个拷贝的T7 RNA聚合酶基因，可以表达噬菌体T7 RNA聚合酶，适合于T7启动子诱导的蛋白表达。
- 该菌株可以表达大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。
| 组分 | 规格 |
| B型大肠杆菌SHuffle T7 Express化学感受态细胞 | 10×100μL |
| 说明书 | 1份 |
保存：-80℃，有效期6个月。
- 感受态细胞最好在冰中缓慢融化。插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
- 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
- 诱导时，IPTG浓度可选（0.1～10mM均可）。
- 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。
- B型大肠杆菌SHuffle T7 Express菌株具有链霉素，壮观霉素抗性，不可用于具有链霉素，壮观霉素抗性质粒的转化。
- 从-80℃拿出B型大肠杆菌SHuffle T7 Express感受态细胞，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的质粒，并用手拨打EP管底轻轻混匀（避免用枪吸打），冰中静置25分钟。
- 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
- 向离心管中加入700μL不含抗生素的无菌培养基（LB），混匀后37℃，200转/分钟复苏60分钟。
- 5000×g离心1分钟收集菌体，留取50μL左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上。
- 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
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