产品货号：
BTN60105
中文名称：
平末端DNA加A试剂盒
英文名称：
dA Tailing Kit
产品规格：
50T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转移酶活性，在只有dATP存在的情况下，在平末端的DNA片段加上一个dA尾巴，使平末端片段也能被T载体克隆。
- 简单，2×加A MasterMix中含有所需要的所有成分，不需要单独准备。
- 适用于任何平末端的DNA片段，包括Pfu DNA polymerase等酶合成的DNA片段。
- 产物可以直接用于与T载体的连接。
| 组分 | 规格 |
| 2×加A MasterMix | 1mL |
| 说明书 | 1份 |
保存：-20℃，有效期1年。
PCR片段、超纯水
- 反应前纯化处理：用Vent、Deep Vent、Pfu、Pwo等具有3 → 5外切活性的DNA聚合酶扩增得到的DNA片段，必须经过彻底的去除残留的酶的处理过程（如酚/氯仿抽提或Proteinase K处理），否则它们将在加A反应时，切除掉加上的A尾巴，干扰反应。可以采取胶回收和酚/氯仿抽提法等常规方法纯化，最后溶解在水或TE中，终浓度以0.1μg/μL为宜。
- 加A反应：在干净的0.5mL或1.5mL离心管中，分别加入回收的DNA片段(0.2～2μg)，25μL 2×加A MasterMix，补水到50μL后72℃保温2小时。
- 反应后处理：加A反应后，Taq DNA polymerase将与DNA末端紧密结合，所以必须酚/氯仿抽提去除。如果使用Proteinase K处理后再用酚/氯仿抽提效果会更好。得到的DNA溶于适量水和TE中后即可用于T载体的连接反应。
相关搜索：平末端DNA加A试剂盒，加A尾，dA Tailing Kit