产品货号:
BTN140385
中文名称:
农杆菌LBA4404化学感受态细胞
英文名称:
E.coli LBA4404 Chemical Competent Cell
产品规格:
10×100μL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本产品为LBA4404农杆菌化学感受态细胞,其具有利福平和链霉素抗性,适用于玉米、烟草等植物的转基因操作,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达103cfu/μg。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期一年。
自备试剂:质粒DNA、液氮等
使用方法:
转化前准备
1.冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3.将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1.取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
2.无菌条件下,向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒,每100μL感受态细胞加1ug质粒DNA,轻柔混匀。冰水浴中静置10分钟。
3.将离心管置于液氮中速冻5分钟(注:也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4.迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟,不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5.加入800μl无抗生素的2×YT或LB液体培养基,28-30℃振荡培养2~3小时。使菌体复苏,表达抗性。
6.5000rpm离心1分钟收菌,保留100μL左右上清,轻轻吹打重悬菌体,均匀涂布到含有相应抗生素的LB固体培养基平板上,待平板中的液体完全吸收后,倒置平板,28-30℃培养48-72小时。
相关搜索:农杆菌LBA4404化学感受态细胞,E.coli LBA4404 Chemical Competent Cell
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期一年。
自备试剂:质粒DNA、液氮等
使用方法:
转化前准备
1.冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3.将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1.取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
2.无菌条件下,向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒,每100μL感受态细胞加1ug质粒DNA,轻柔混匀。冰水浴中静置10分钟。
3.将离心管置于液氮中速冻5分钟(注:也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4.迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟,不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5.加入800μl无抗生素的2×YT或LB液体培养基,28-30℃振荡培养2~3小时。使菌体复苏,表达抗性。
6.5000rpm离心1分钟收菌,保留100μL左右上清,轻轻吹打重悬菌体,均匀涂布到含有相应抗生素的LB固体培养基平板上,待平板中的液体完全吸收后,倒置平板,28-30℃培养48-72小时。
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