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DNA快速连接试剂盒图片
产品货号:
ALH353
中文名称:
DNA快速连接试剂盒
英文名称:
DNA Quick Ligation Kit
产品规格:
20T|60T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本试剂盒可在室温(22℃) 10分钟条件下,迅速完成DNA片段粘端或平端连接反应。连接产物可直接转化。可用于DNA片段克隆、文库构建、TA克隆、Linker连接等。




组分20T60T
2×Quick Ligation Buffer100μL300μL
T4 DNA ligase(5U/μL)20μL60μL

保存:-20℃,避免反复冻融。


  • 反应按以下体系进行:
    成分用量
    2×Quick Ligation Buffer5μL
    Vector DNA30~60ng
    Insert DNA插入和载体摩尔比为3:1
    无菌水至9μL
    T4 DNA Ligase(5U/μL)1μL
    • 一般最后加入T4 DNA Ligase,充分混匀,可瞬间离心收集液体至管底。
    • DNA片段体积大于4μL的,可增加2×Quick Ligation Buffer,总反应体积相应可以增至20μL,这样在连接体系中可加入更大体积的DNA片段。
  • 22℃连接10分钟(一般可在PCR仪器完成)。
    • 通常推荐22℃连接5~10分钟,>3kb长片段连接可以延长至30分钟。不推荐超过30分钟,超过可能降低转化子数量。
  • 冰上冷却,然后直接转化或贮存于-20℃。
    • 如储存于-20℃,转化前应该置冰上重新溶解,充分混匀后进行转化。
    • 转化前不要热灭活T4 DNA ligase,否则将降低转化效率。

相关搜索:DNA快速连接试剂盒DNA连接黏末端DNA连接平末端DNA连接粘端DNA连接平端DNA连接DNA Quick Ligation Kit
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