产品货号:
JH0050
中文名称:
人中性粒细胞分离液
英文名称:
Human neutrophils separation solution
产品规格:
200mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
产品组成:
外周血中性粒细胞的分离步骤:
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编号 | 组分 | 规格 |
A | 分离液1 | 200mL |
B | 清洗液(赠品) | 200mL×2 |
C | 红细胞裂解液(赠品) | 100mL |
外周血中性粒细胞的分离步骤:
- 血液样本量小于5mL时,实验方法如下:
- 取一支15mL离心管,先加入3mL试剂A后加入2mL试剂C,制成梯度界面。
- 用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上,400~550g,离心20~30min。
注:如改变血液样本及分离液用量,需相应调整离心力及离心时间,具体离心条件需客户自行摸索,以达到最佳分离效果。 - 离心后,离心管中将出现两层环状乳白色细胞层,上层细胞为单个核细胞层,下层细胞为中性粒细胞层。
- 用吸管小心吸取分离液中的中性粒细胞层,如有红细胞混杂则加入适量红细胞裂解液(货号:JH0800)将红细胞裂解(具体方法见“红细胞裂解液使用说明”)即得目的细胞。
- 将获得的细胞层移至另一15mL离心管中,向所得离心管中加入10mL清洗液(货号:JH0801),混匀细胞。
- 250g,离心10min。
- 弃上清。
- 用吸管以5mL清洗液(货号:JH0801)重悬所得细胞。
- 250g,离心10min。
- 重复7、8、9,弃上清后以0.5mL后续实验所需相应液体重悬细胞。
- 取一支15mL离心管,先加入3mL试剂A后加入2mL试剂C,制成梯度界面。
- 血液样本量大于等于5mL时,实验方法如下:
- 取一支适当的离心管,依次小心加入试剂A、试剂C(试剂A与试剂C体积比为3:2,试剂总量与稀释后的样本量相等),制成梯度界面。
- 将血液样本小心加于分离液之液面上,450~650g(最大离心力可至1000g),离心20~30min。
注:根据血液样本量确定离心条件,血液量越多,离心力越大,离心时间越长,具体离心条件需客户自行摸索,以达到最佳分离效果。加入血液样本后,样本及分离液总体积不得超过离心管总体积的三分之二。 - 剩余步骤同情况A中步骤3至步骤10。
- 取一支适当的离心管,依次小心加入试剂A、试剂C(试剂A与试剂C体积比为3:2,试剂总量与稀释后的样本量相等),制成梯度界面。
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