产品货号：
SNM592
中文名称：
硝酸还原酶测定试剂盒(微量法)
英文名称：
Nitrate reductase assay kit
产品规格：
100管/48样
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本试剂盒可测各种新鲜植物等样本中硝酸还原酶(NR)活力。
NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐，NO3-＋NADH＋H+ →NO2-＋NAD+＋H2O。产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下，与对氨基苯磺酸及α-萘胺定量生成红色偶氮化合物；生成的红色偶氮化合物在540nm有最大吸收峰。可用分光光度法测定。
硝酸还原酶是植物氮素代谢中氮素同化的关键酶，它与作物吸收利用氮肥有关，对作物的产量和品质有影响。因而可以把硝酸还原酶的活力当作植物营养或农田施肥的指标之一，也可作为品种选育的重要指标。
保存：2～8℃，有效期6个月。
试剂三如果出现结晶析出，60℃～90℃水浴溶解后使用
酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、离心机、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
C 标准：标准液浓度，0.1μmol/mL；
V1：加入样本体积：20μL；
V2：加入提取液体积，1mL；
T：反应时间，0.5h；
W：样本鲜重，g；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg prot/mL(prot指蛋白)
相关搜索：硝酸还原酶测定试剂盒(微量法)，硝酸还原酶，Nitrate reductase assay kit
NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐，NO3-＋NADH＋H+ →NO2-＋NAD+＋H2O。产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下，与对氨基苯磺酸及α-萘胺定量生成红色偶氮化合物；生成的红色偶氮化合物在540nm有最大吸收峰。可用分光光度法测定。
硝酸还原酶是植物氮素代谢中氮素同化的关键酶，它与作物吸收利用氮肥有关，对作物的产量和品质有影响。因而可以把硝酸还原酶的活力当作植物营养或农田施肥的指标之一，也可作为品种选育的重要指标。
| 组分 | 规格 | 保存条件 |
| 诱导剂储备液：液体 | 50mL | 4℃ |
| 提取液：液体 | 60mL | 4℃ |
| 试剂一：液体 | 10mL | -20℃ |
| 试剂二：液体 | 5mL | -20℃ |
| 试剂三：液体 | 6mL | 4℃ |
| 试剂四：液体 | 6mL | 4℃ |
| 试剂五：标准储备液 | 1mL | -20℃ |
保存：2～8℃，有效期6个月。
试剂三如果出现结晶析出，60℃～90℃水浴溶解后使用
酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、离心机、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
- 诱导剂应用液的配制：用时将诱导剂储备液稀释10倍，即取10mL诱导剂储备液加90mL蒸馏水，充分混匀。
- 0.1μmol/mL的标准液的配制：用时将试剂五稀释100倍，即取0.1mL试剂五加9.9mL蒸馏水，充分混匀。
- 组织的前处理：
- 取适量诱导剂于烧杯中，将新鲜样标洗净，滤纸吸干，放入诱导剂应用液中（淹没即可），浸泡2h，取出样本，滤纸吸干。（一般不要诱导处理，预测定结果没有活性即A测定≤A对照，则需要诱导处理）
- 按照组织质量（g）∶提取液体积（mL）为1∶5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰水代测。
- 取适量诱导剂于烧杯中，将新鲜样标洗净，滤纸吸干，放入诱导剂应用液中（淹没即可），浸泡2h，取出样本，滤纸吸干。（一般不要诱导处理，预测定结果没有活性即A测定≤A对照，则需要诱导处理）
- 细菌或培养细胞的前处理：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）；提取液体积（mL）为500-1000∶1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min。取上清，置冰上代测。
- 分光光度计预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
- 测定步骤：（在EP管或96孔板中加入下列试剂）
成分(μL) 测定孔 对照孔 标准孔 空白孔 样本 20 20 0.1μmol/mL标准液 20 蒸馏水 75 95 试剂一 75 75 试剂二 25 25 25 25 混匀后，37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）反应30min。 试剂三 50 50 50 50 试剂四 50 50 50 50 混匀，25℃温室显色20min，540nm处比色。 - 标准孔和空白孔只需测一次，每个样本需设一个测定孔和一个对照孔。
- 诱导处理后的样本对照孔中，试剂二改成加25μL蒸馏水。
- 标准孔和空白孔只需测一次，每个样本需设一个测定孔和一个对照孔。
- 按样本鲜重计算：
单位定义：每小时每g鲜重样中催化产生1μmol NO2-的量为一个NR活力单位。NR活力
(μmol/h/g鲜重)＝ A测定－A对照 ×C标准× V1 ÷T A标准－A空白 W×V1÷V2 ＝ 0.2× A测定－A对照 ÷W A标准－A空白 - 按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每小时每mg组织蛋白催化产生1μmolNO2-的量为一个NR活力单位。NR活力
(μmol/h/mgprot)＝ A测定－A对照 ×C标准× V1 ÷T A标准－A空白 Cpr×V1 ＝ 0.2× A测定－A对照 ÷Cpr A标准－A空白
C 标准：标准液浓度，0.1μmol/mL；
V1：加入样本体积：20μL；
V2：加入提取液体积，1mL；
T：反应时间，0.5h；
W：样本鲜重，g；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg prot/mL(prot指蛋白)
相关搜索：硝酸还原酶测定试剂盒(微量法)，硝酸还原酶，Nitrate reductase assay kit