产品货号：
SNM278
中文名称：
肌酸激酶MB同工酶测定试剂盒(免疫抑制法)
英文名称：
Creatine kinase MB isoenzyme Assay Kit
产品规格：
R1：40ml×1 R2：10ml×1
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1～3天
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肌酸激酶（Creatine Kinase Isoenzyme，CK-MB）有四种同功酶形式：肌肉型（MM）、脑型（BB）、杂化型（MB）和线粒体型（MiMi）。MM型主要存在于各种肌肉细胞中，BB型主要存在于脑细胞中，MB型主要存在于心肌细胞中，MiMi型主要存在于心肌和骨骼肌线粒体中。肌酸激酶的同功酶有着十分重要的意义，在各种病变包括肌肉萎缩和心肌梗塞发生时，血清中肌酸激酶水平迅速提高，目前认为在心肌梗塞的诊断中测定肌酸激酶的活性比做心电图更为可靠。其中肌酸激酶的同工酶CK-MB诊断的特异性最高。肌酸激酶因其具有重要的生理功能和临床应用价值已引起人们广泛的重视和深入的研究。
肌酸激酶（CK）由M和B二个亚单位组成三种的二聚体，CK1（BB）、CK2（MB）、CK3（MM）主要存在于胞浆中，另外血清中还有少量的线粒体同工酶（CK-MiMi）。心肌中CK活力较高（仅次于骨骼肌），其中CK-MB约占13～22%（骨骼肌中<1%），因此其作为心肌损伤的指标具有特异性。本试剂盒采用免疫抑制法，用抗M血清，抑制M亚单位，然后测定剩余的B亚单位活性，乘2即得CK-MB活力。
340nm测定NADPH的生成速率，计算出CK-MB活力。
| 组分 | 规格 |
| 试剂一（R1） | 40mL |
| 试剂二（R2） | 10mL |
保存：2～8℃，有效期1年。
| 试剂 | 成分 | 终浓度 |
| 试剂一 | 咪唑缓冲液(pH6.6) | 100×10-3mol/L |
| 葡萄糖 | 20×10-3mol/L | |
| 醋酸镁 | 10×10-3mol/L | |
| 乙二胺四乙酸 | 2×10-3mol/L | |
| 己糖激酶（HK） | 3000U/L | |
| 二磷酸腺苷（ADP） | 2×10-3mol/L | |
| 单磷酸腺苷 | 5×10-3mol/L | |
| 二腺苷戊磷酸 | 10×10-6mol/L | |
| N-乙酰半胱氨酸 | 20×10-3mol/L | |
| 氧化型辅酶II（NADP+） | 2×10-3mol/L | |
| 抑制CK-M抗体 | 2000U/L | |
| 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 | 2500U/L | |
| 试剂二 | 肌酸磷酸 | 30×10-3mol/L |
适用于紫外分光光度计比色测定或自动生化分析仪比色测定。
| 线性范围 | 0～800U/L（判定依据：r2≧0.995） |
| 空白吸光度 | A340nm（1cm）≦0.5 |
| 空白变化率 | △ A/min≦0.002 |
| 准确度 | 不准确度≦15% |
| 精密度 | 批内CV<6.0%；批间相对极差<15.0% |
- 血清或血浆，采血后应及时分离，避免溶血。除肝素外其他抗凝剂对CK有抑制作用。
- CK的主要干扰物是腺苷激酶（AK），它在红细胞中的含量丰富，AK催化ADP转化乘ATP导致CK测定增高，10U/L的AK相当于1U/L的CK，因此标本应避免溶血。
一、手工（分光光度计）测定
- 按下表加入各成分：
成分 用量 样品 40μL 试剂一（R1） 800μL 试剂二（R2） 200μL - 混匀，37℃孵育2分钟，1cm光径4mm内径石英狭缝比色皿，340nm波长，读取吸光度值A1。
- 继续孵育3分钟，读吸光度值A2，△A=A2-A1。
- 计算公式：
CK-MB活力(U/L)=△A/min×F(8360)
1000＝U/mL到U/L的转换系数；F＝ 反应总体积(mL)×1000 ×2 样品体积(mL)×毫摩尔消光系数×1
1＝比色皿光径
NADPH在340nm处的毫摩尔系数：6.22- 若使用0.5光径石英比色皿比色，则计算公式中F＝16720。
二、生化分析仪测定
主要参数：
| 主波长 | 340nm | 反应方法 | 速率法 | 反应温度 | 37℃ |
| 辅助波长 | 405nm | 反应方向 | 向上 | 计算因子 | 8360 |
- 按下表加入各成分：
成分 用量 样品 10μL 试剂一（R1） 200μL 试剂二（R2） 50μL - 混匀，37℃孵育2min，连续监测1～3分钟吸光度变化，计算△A/min
- 计算公式：
CK-MB活力(U/L)=△ A/min×F(8360)
1000＝U/mL到U/L的转换系数；F＝ 反应总体积(mL)×1000 ×2 样品体积(mL)×毫摩尔消光系数×1.0
1.0＝比色皿光径
NADPH在340nm处的毫摩尔系数：6.22
0～25U/L
- 本参考范围适用人血清浆样本，建议各实验室建立自己的参考范围。
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