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乳酸脱氢酶（LDH）存在于人体各组织器官中。LDH是机体能量代谢中的一种重要酶，LDH质与量的改变，直接影响到机体的能量代谢，当机体各组织器官病变时，其组织器官本身的LDH要发生改变，并且可引起血液中LDH改变。

• 快速简便：全程约40分钟，可测50例左右样本。
  
• 取样量微：本法取样量10μL～50μL即可测LDH活力
  
• 稳定性好：试剂盒2～8℃存放3个月有效。
  
• 再现性好：变异系数CV=1.5%。
  
• 回收试验：X =101%。
  
• 受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。

• 分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为440nm）
  
• 恒温水浴箱或气浴箱（孵育温度为37℃）
  
• 漩涡混匀器
  
• 微量移液器

• 辅酶Ⅰ应用液的配制：每支粉剂加1.3mL双蒸水溶解，溶解后冷冻保存2周，如需多次使用建议分装冷冻（防止反复冻融）
  注：粉剂量较少，可能附着于管壁或盖子上，并非空管，如使用时肉眼不可见，可将其4000转/分钟离心2分钟后使用。
  
• 0.4mol/L NaOH溶液配制：将4mol/L NaOH溶液用双蒸水10倍稀释，用多少配多少，现用现配。

• 血清（浆）可直接测定。
  
• 动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
  
• 培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。

• 按下表加入各成分：
  

  成分	空白管	标准管	测定管	对照管
  双蒸水	0.05+a	0.05		0.05
  2μmol/mL标准液		a
  待测样本			a	a
  基质缓冲液	0.25
  辅酶Ⅰ应用液			0.05
  混匀，37℃水浴15分钟
  2，4-二硝基苯肼	0.25
  混匀，37℃水浴15分钟
  0.4mol/L NaOH溶液	2.5

  注：
  
  • 上表各成分使用量单位均为mL
    
  • 对照管中不加辅酶I应用液。
    
  • 严格按照说明书操作，不可先加辅酶I再加基质液。
    
  • 参考取样量：0.2%小鼠脑组织匀浆取10～50μL，大鼠血清取10～30μL。若样本中LDH酶活力太大（测定OD值－对照OD值＞0.2），可将样本用生理盐水稀释后再测。
• 混匀，室温放置3分钟，波长440nm,1cm光径，双蒸水调零，测定各管吸光度值。

• 血清（浆）样本：
  
  • 活性定义：每升血清（浆）37℃与基质作用15分钟，在反应体系中产生1μmol丙酮酸为1个活力单位。
    
  • 计算公式：
    

    血清/浆LDH活性(U/L)＝	A测定－A对照	×(C标准×V标准)×	1	×N
    	A标准－A空白		V样

• 组织样本：
  
  • 活性定义：每克组织蛋白37℃与基质作用15分钟，反应体系中产生1μmol丙酮酸为1个活力单位。
    
  • 计算公式：
    

    组织LDH活性(U/gprot)＝	A测定－A对照	×C标准÷Cpr
    	A标准－A空白

    Cpr：组织样本蛋白浓度，gprot/mL(prot指蛋白)