产品货号：
SNM174
中文名称：
总氨基酸测定试剂盒(比色法)
英文名称：
Total Amino Acid assay kit
产品规格：
80管/78样
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒可用于检测动物组织、尿液、血清（浆）、全血及培养细胞、细胞培养上清液等中的总氨基酸含量。
铜离子（Cu2+）能与各种氨基酸络合产生蓝绿色络合物，在一定波长下颜色的深浅与总氨基酸的含量成正比，故可以用可见光分光光度计测其吸光度，通过换算得到总氨基酸含量。
- 快速。本反应只要15分钟即可结束检查。
- 稳定性好，该法经多次重复试验，其结果相当稳定。
- 本法测定的是游离态的氨基酸。
| 组分 | 规格 |
| 试剂一：粉剂 | 1支 |
| 试剂二：液体 | 5mL |
| 试剂三：粉剂 | 1支 |
| 试剂四：甘氨酸标准品 | 75.07mg×6 |
| 试剂五：液体 | 100mL |
保存：2～8℃，有效期6个月。
含650nm波长的分光光度计及1cm光径比色皿（或酶标仪及96孔板）、台式低速离心机（3500rpm）、各种规格移液器、双蒸水、生理盐水（0.9%）或PBS（0.1M）、涡旋混匀器、试管或离心管、蛋白测定试剂（组织及细胞样本用）。
- 氨基酸反应液的配制：将试剂一加双蒸水160mL，充分混匀成蓝色混悬液，再缓慢滴加试剂二，边滴边搅至混悬液全部转换成淡蓝色透明溶液为止，4℃保存。
- 粉剂较难溶解，试剂二滴加完后还需室温搅拌混匀半小时以上才能溶解完全。
- 氨基酸显色剂配制：将试剂三加水80mL充分混匀。
- 有腐蚀性，配制时勿碰皮肤。
- 50mM甘氨酸标准溶液的配制：将一支甘氨酸标准品溶于20mL双蒸水中，充分混匀，现用现配。
- 在滴加试剂二时，一定要缓慢，且尽量要使混悬物完全溶解。使氨基酸反应液成为浅蓝色透明溶液。
- 试剂三在配制时要注意，尽量避免碰到皮肤，该试剂有一定腐蚀性。
- 做本试验后的试管要用热水加肥皂粉煮，自来水冲洗干净，否则用这种试管测量其它酶反应时会影响酶的活力。推荐使用一次性实验用塑料试管操作。
- 尿液样本：
- 操作表：
成分 空白管 标准管 测定管 双蒸水 1mL 50μmol/mL氨基酸标准液 1mL 尿液 1mL 氨基酸反应液 2mL 旋涡混匀。 氨基酸显色剂 1mL 混匀，3500转/分离心10分钟，取上清液于650nm处，1cm光径，双蒸水调零比色。 - 计算公式：
尿液中总氨基酸含量
(μmol/mL)＝ A测定－A空白 ×C标准×N A标准－A空白
C标准：标准液浓度，50μmol/mL;
N：样本测试前稀释倍数。
- 操作表：
- 血清(浆)样本：
- 操作表：
成分 空白管 标准管 测定管 双蒸水 0.3mL 50μmol/mL氨基酸标准液 0.3mL 血清（浆） 0.3mL 试剂五 1.2mL 充分混匀，3500转/分离心10分钟取1mL上清液待测。 上清液 1mL 氨基酸反应液 2mL 旋涡混匀 氨基酸显色剂 1mL 混匀，3500转/分离心10分钟，取上清液于650nm处，1cm光径，双蒸水调零比色。 - 计算公式：
血清中总氨基酸含量
(μmol/mL)＝ A测定－A空白 ×C标准×N A标准－A空白
C标准：标准液浓度，50μmol/mL;
N：样本测试前稀释倍数。
- 操作表：
- 组织样本
- 样本前处理：准确称取组织重量，按重量体积比加入9倍生理盐水，制成10%匀浆，3500转/分离心10分钟，取上清待测。同时取10%匀浆上清进行蛋白测定。
- 操作表：
成分 空白管 标准管 测定管 双蒸水 0.3mL 50μmol/mL氨基酸标准液 0.3mL 匀浆 0.3mL 试剂五 1.2mL 充分混匀，3500转/分离心10分钟取1mL上清待测。 上清 1mL 氨基酸反应液 2mL 旋涡混匀 氨基酸显色剂 1mL 混匀，3500转/分离心10分钟，取上清液于650nm处，cn光径，双蒸水调零比色。 - 计算公式：
组织中总氨基酸含量
(μmol/mg蛋白)＝ A测定－A空白 ×C标准÷Cpr A标准－A空白
C标准：标准液浓度，50μmol/mL；
Cpr：组织样本蛋白浓度，mg/mL。 - 计算举例：
取10%小鼠肝组织匀浆0.3mL按操作表进行检测，测得空白管吸光度为0.051，标准管吸光度为0.123，测定管吸光度为0.067，同时测得10%匀浆上清蛋白浓度为8.251mgprot/mL，则计算结果为：组织中总氨基酸含量
(μmol/mg蛋白)＝ 0.067－0.051 ×C标准÷Cpr 0.123－0.051 ＝ 1.347μmol/mg蛋白
- 样本前处理：准确称取组织重量，按重量体积比加入9倍生理盐水，制成10%匀浆，3500转/分离心10分钟，取上清待测。同时取10%匀浆上清进行蛋白测定。
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